高產(chǎn)洛伐他汀紅曲霉菌誘變育種及其在醬油廢水中的應(yīng)用.pdf

1、自從發(fā)現(xiàn)紅色紅曲霉菌(M.ruber)產(chǎn)生強(qiáng)降膽固醇物質(zhì)洛伐他汀之后,國內(nèi)外學(xué)者掀起了降脂紅曲霉菌的研究熱潮。目前洛伐他汀的研究主要集中在洛伐他汀的合成基因、發(fā)酵工藝的優(yōu)化以及高產(chǎn)菌種選育等方面。很少涉及有關(guān)發(fā)酵基質(zhì)替代方面的研究,醬油廢水中含有豐富的氮源,能被微生物充分利用。因此,利用醬油廢水生產(chǎn)洛伐他汀具有一定的社會(huì)與經(jīng)濟(jì)意義。
　　本研究主要通過氯化鋰誘變篩選高產(chǎn)洛伐他汀的紅曲霉菌株;研究此菌株高產(chǎn)洛伐他汀的發(fā)酵條件及其工藝

2、參數(shù);通過馴化此菌株研究其利用醬油廢水生產(chǎn)洛伐他汀的影響因素。其結(jié)果如下:
　　對(duì)實(shí)驗(yàn)室保存的紅曲霉菌株進(jìn)行氯化鋰誘變,最終篩選出六株有較好正突變的菌株。其中三株正突變株的產(chǎn)洛伐他汀能力大大提高,比出發(fā)菌株分別提高了214％(HW3)、239%(HW5)、169%(HW6)。菌株HW2、HW3和HW5的遺傳穩(wěn)定性相對(duì)較好。在馴化實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),菌株HW2在醬油廢水中表現(xiàn)較強(qiáng)適應(yīng)能力,且生產(chǎn)洛伐他汀的性能較好。
　　目前洛伐他汀含

3、量檢測(cè)的方法主要為HLPC,其檢測(cè)過程復(fù)雜、耗時(shí),不能直觀的檢測(cè)到高產(chǎn)紅曲霉菌株。而紅曲霉菌發(fā)酵生產(chǎn)洛伐他汀的過程中往往伴隨紅曲色素的生產(chǎn)。因此,研究紅曲色素和洛伐他汀兩者之間的相關(guān)性,能簡便篩選出高產(chǎn)洛伐他汀的紅曲霉菌。本研究結(jié)果表明,培養(yǎng)基中無論是碳源還是氮源,其色價(jià)與洛伐他汀產(chǎn)量之間具有良好的正相關(guān)性,其相關(guān)系數(shù)均達(dá)到0.91以上。
　　通過單因素實(shí)驗(yàn)和正價(jià)實(shí)驗(yàn)獲得了HW2搖瓶發(fā)酵的最佳工藝條件:轉(zhuǎn)速180r/min、6%蔗