替米沙坦對(duì)長期HSHF膳食喂養(yǎng)大鼠內(nèi)臟脂肪組織作用的研究.pdf

1、目的：
　　1．觀察替米沙坦對(duì)長期高糖高脂（HSHF）膳食喂養(yǎng)的SD大鼠體重、胰島素抵抗程度和空腹血糖的影響。
　　2．觀察替米沙坦對(duì)長期高糖高脂膳食喂養(yǎng)的SD大鼠的附睪脂肪細(xì)胞的體積，以及脂肪組織中浸潤的巨噬細(xì)胞數(shù)量和極化的影響，探討替米沙坦改善長期高糖高脂膳食喂養(yǎng)的SD大鼠胰島素抵抗方面的可能的機(jī)制。
　　方法：
　　6周齡同窩雄性清潔級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組（8只）和實(shí)驗(yàn)組（24只），正常對(duì)照組采用普通

2、飼料喂養(yǎng)36周，實(shí)驗(yàn)組采用高糖高脂膳食飼養(yǎng)24周后再隨機(jī)分為3個(gè)組：高糖高脂喂養(yǎng)組（高糖高脂組、8只）、高糖高脂替米沙坦干預(yù)組（替米沙坦組、8只）及高糖高脂生理鹽水干預(yù)組（生理鹽水組、8只），高糖高脂組大鼠持續(xù)采用高糖高脂膳食飼養(yǎng)12周；替米沙坦組大鼠則采用高糖高脂飲食及替米沙坦（5mg/kg/d，溶于2ml生理鹽水灌胃）治療12周；生理鹽水組大鼠采用高糖高脂膳食及2ml生理鹽水灌胃干預(yù)12周。36周時(shí)，即實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)各組大鼠全部進(jìn)行實(shí)驗(yàn)

3、。實(shí)驗(yàn)方法：1.應(yīng)用無創(chuàng)尾套加壓法測(cè)定大鼠的血壓（收縮壓與舒張壓），稱重，腹腔注射烏拉坦麻醉，開腹經(jīng)大鼠腹主動(dòng)脈放血，留取血標(biāo)本，置于低速離心機(jī)離心，離心機(jī)設(shè)置：3000r/min，15min，隨后分離上層血清分別裝入EP管于﹣80℃低溫冰箱凍存，同批測(cè)定下列指標(biāo)：空腹血糖（FPG)、甘油三酯（TG）、空腹胰島素（FINS）。計(jì)算穩(wěn)態(tài)模型評(píng)估法胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR，HOMA-IR=FINS×FBG/22.5。2.摘除大鼠左側(cè)附

4、睪脂肪組織放入10％中性甲醛溶液中進(jìn)行固定處理，隨后制作成石蠟切片，經(jīng)常規(guī)HE染色，放置于光學(xué)顯微鏡下對(duì)附睪脂肪細(xì)胞體積進(jìn)行觀察；免疫組織化學(xué)的方法測(cè)定脂肪組織中巨噬細(xì)胞分子標(biāo)志物CD68的表達(dá)。摘除大鼠右側(cè)附睪脂肪組織迅速投于液態(tài)氮，稍后移入﹣80℃低溫冰箱，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法（RT-PCR）測(cè)定大鼠附睪脂肪組織中M1型以及M2型巨噬細(xì)胞分子標(biāo)志物一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶1（arg1）的表達(dá)。
　　結(jié)果：

5、>　　1．實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，四組大鼠體重、血壓的比較
　　和正常對(duì)照組相比，高糖高脂組體重、收縮壓明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），舒張壓趨向于升高，但在統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異無意義（p>0.05）；與高糖高脂組相比，替米沙坦組體重、收縮壓及舒張壓均顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；高糖高脂組和生理鹽水組相比，體重、收縮壓、舒張壓差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。
　　2．實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各組大鼠FPG、TG、FINS、H

6、OMA-IR的變化
　　與正常對(duì)照組比較，高糖高脂組FPG、TG、FINS、HOMA-IR水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；與高糖高脂組相比，替米沙坦組FPG、TG、FINS、HOMA-IR水平均顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。高糖高脂組和生理鹽水組相比，F(xiàn)PG、TG、FINS、HOMA-IR水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。
　　3．實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各組大鼠附睪脂肪細(xì)胞的體積變化。
　　正常

7、對(duì)照組可觀察到脂肪細(xì)胞排列規(guī)整，大小均一，體積小，圓潤；高糖高脂組可見脂肪細(xì)胞排列混亂，體積大小不均等，體積較大；與高糖高脂組比較，替米沙坦組大鼠脂肪細(xì)胞體積較小，大小均一性較好。生理鹽水組大鼠脂肪細(xì)胞體積不均一，體積較大，與高糖高脂組相似。
　　4．實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各組大鼠附睪脂肪組織中巨噬細(xì)胞分子標(biāo)記物CD68表達(dá)水平的變化。
　　和正常對(duì)照組比較，高糖高脂組大鼠內(nèi)臟脂肪組織中CD68表達(dá)顯著增加（p<0.05），和高糖高脂

8、組相比，替米沙坦組大鼠內(nèi)臟脂肪組織CD68表達(dá)水平均顯著降低（p<0.05）。
　　5．實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各組大鼠內(nèi)臟脂肪組織中M1型巨噬細(xì)胞分子標(biāo)志物iNOS的變化。
　　和正常組相比較，高糖高脂組脂肪組織中iNOS水平顯著增加（p<0.05）；與高糖高脂組相比，替米沙坦組iNOS表達(dá)水平均顯著降低（p<0.05）。
　　6．實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各組大鼠內(nèi)臟脂肪組織中M2型巨噬細(xì)胞分子標(biāo)志物Arg1水平的變化。
　　和正常對(duì)

9、照組相比，高糖高脂組內(nèi)臟脂肪組織中Arg1表達(dá)水平明顯降低（p<0.05）；和高糖高脂組相比，替米沙坦組大鼠內(nèi)臟脂肪組織中Arg1水平均顯著上升（p<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.替米沙坦能夠減輕長期高糖高脂膳食喂養(yǎng)大鼠的體重，降低血壓，調(diào)節(jié)其糖脂代謝，減輕胰島素抵抗。
　　2.替米沙坦可能通過減小長期高糖高脂膳食喂養(yǎng)大鼠附睪脂肪細(xì)胞的體積和其中的甘油三酯含量，以及下調(diào)脂肪組織中浸潤的巨噬細(xì)胞數(shù)量，并促進(jìn)巨噬細(xì)胞向