基于金納米籠放大技術(shù)熒光法檢測腫瘤細(xì)胞中的ATP.pdf

1、近年來,隨著生物分子學(xué)的發(fā)展,利用DNA生物傳感器檢測生物分子成為生命科學(xué)和材料科學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。本文將結(jié)合納米技術(shù)與DNA生物傳感器技術(shù),研究生物分子的高靈敏檢測方法。結(jié)果表明,制備的傳感器檢測靈敏度高,制備方法簡單,能夠?qū)崿F(xiàn)快速檢測,在生物分子分析中具有廣闊的應(yīng)用前景。
　　本文主要開展了以下幾個(gè)方面的工作:
　　一、銀納米立方體顆粒、金納米籠狀顆粒的合成與放大
　　本文采用乙二醇還原硝酸銀和乙二醇還原三氟乙酸銀

2、兩種方法合成銀納米立方體,合成的銀納米立方體顆粒在50-70 nm,并對兩種方法進(jìn)行對比討論,用第二種方法實(shí)現(xiàn)放大合成。以銀納米立方體為模版,置換法合成金納米籠狀顆粒,通過LSPR峰與電子顯微鏡表征結(jié)果對照,得出最佳反應(yīng)條件,合成了60-70 nm的金納米籠。然后在此基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)放大合成。
　　二、基于金納米籠放大技術(shù)的ATP生物傳感器的制備與ATP的檢測
　　本文利用金納米籠的空心籠狀結(jié)構(gòu),在其內(nèi)部負(fù)載熒光物質(zhì),用巰基DNA

3、鏈和ATP適體鏈包裹金納米籠,使熒光物質(zhì)封堵在籠內(nèi)。為了方便分離,將金納米籠組裝到磁珠上。在最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件下,即巰基鏈和適體鏈為10-6 M,反應(yīng)溫度37℃下,反應(yīng)時(shí)間30min,可在1.0×10-7-1.0×10-5M范圍內(nèi)實(shí)現(xiàn)對ATP的檢測。該傳感器在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有較大的應(yīng)用潛力,可用于不同目標(biāo)分子的特異性檢測。為癌癥等重大疾病的早期診斷及治療提供新的途徑和方法。
　　三、ATP探針在細(xì)胞內(nèi)熒光成像
　　金納米籠內(nèi)填充熒