基于納米金的新型熒光法檢測DNA.pdf

1、基因是遺傳的物質基礎，控制著人類的生老病死?；驒z測對一些疾病的診斷和預防具有重要的意義。乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，嚴重威脅著女性的健康。乳腺癌易感基因(BRCA1)在乳腺細胞周期的調控、基因轉錄調節(jié)和維持基因穩(wěn)定性中起著重要的作用。BRCA1的突變則會削弱這些功能，從而增加乳腺癌發(fā)病的危險度。因此對該基因進行檢測對乳腺癌的早期診斷和癌癥預測具有重要的意義。
　　 近年來，納米材料的迅速發(fā)展為分子生物學提供了新的途徑。納

2、米材料的特殊性質如表面效應、小尺寸效應、量子效應和宏觀量子隧道效應等使其在疾病診斷、環(huán)境監(jiān)控、藥物研究及法醫(yī)鑒定等領域起著重要的作用。納米金作為一種重要的納米材料，在DNA的檢測中被作為檢測探針、固定載體和熒光猝滅劑廣泛使用。
　　 方法的靈敏度和簡便性是DNA檢測中的重要部分。本論文建立了兩種不同的DNA熒光檢測方法，兩種方法均利用單雙鏈DNA在納米金表面不同的吸附性質和納米金作為熒光猝滅劑的特性，探索提高DNA檢測靈敏度和實

3、現快速檢測的新途徑。
　　 論文共分為三個部分：
　　 一、概述了DNA的結構及常見的檢測方法。著重介紹了DNA熒光探針、納米金的特性、合成方法及其在DNA檢測中的應用。
　　 二、建立了一種基于納米金猝滅羅丹明B熒光的免標記法檢測DNA。該方法同時利用了單雙鏈DNA在納米金表面的不同吸附性質和不同聚集程度的納米金對染料猝滅能力不同的性質，基于靶目標的加入引起的體系熒光信號的增強，實現了DNA的高靈敏檢測。在最佳

4、實驗條件下，該方法的檢出限為2.9×10-13 mol L-1。該方法無需進行任何標記，檢測過程簡單快速。
　　 三、建立了一種基于納米金和核酸外切酶Ⅲ的循環(huán)熒光放大法檢測DNA。該方法同樣將納米金作為猝滅劑，不僅利用了單雙鏈DNA在納米金表面不同的吸附性質，同時還引入了核酸外切酶Ⅲ對雙鏈DNA的水解作用實現了熒光信號的放大，從而提高DNA檢測的靈敏度。一方面，納米金的引入簡化了降低體系的背景信號的過程；另一方面在核酸外切酶的作