熒光納米顆粒在腫瘤早期檢測中的應(yīng)用.pdf

1、近年來隨著納米技術(shù)的蓬勃發(fā)展，一些新興學科如納米化學、納米生物學、納米材料學、納米藥物學等也得到了飛速的發(fā)展。納米材料因其材料尺寸進入納米量級(0.1nm-100nm)而具有諸如小尺寸效應(yīng)、表面效應(yīng)和宏觀量子隧道效應(yīng)等獨特效應(yīng)，表現(xiàn)出了一系列獨特的力學、電學、光學、磁學以及催化性能，從而在諸多領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用。在納米材料的一個重要分支一納米顆粒中，功能化納米顆粒的應(yīng)用已經(jīng)成為當前研究的熱點。功能化生物納米顆粒的出現(xiàn)使傳統(tǒng)生物傳感器

2、的檢測尺度大為縮小。研究表明，功能化生物納米顆粒是一種非常理想的原位、活體、實時獲取生命信息的工具。因此，開展功能化生物納米顆粒的研制與應(yīng)用研究意義重大。本論文以有機熒光染料異硫氰酸羅丹明(TRITC)為核，二氧化硅為殼的熒光納米顆粒的制備為基礎(chǔ)，開展了以下一系列的工作： 1.以環(huán)已烷，正已醇，曲拉通、TRITC及四乙氧基硅烷(TEOS)等為主要原料，采用微乳液法成核硅烷化試劑包殼的方法制各了核殼熒光(TRITC)納米顆粒。通過

3、透射電子顯微鏡(TEM)、熒光分光光度計等儀器對其進行了表征，考察了包括內(nèi)核染料濃度、納米顆粒的熒光染料泄露等多種因素對熒光納米顆粒成功制備的影響。研究結(jié)果表明：制備的核殼熒光納米顆粒沒有改變內(nèi)核染料自身的熒光特性；內(nèi)核染料濃度為0.06 mmol/L時所制備出的納米顆粒熒光強度最大；納米顆粒包埋的熒光染料不易泄露且熒光穩(wěn)定性較好。 2.通過四乙氧基硅烷(TEOS)和N-(B-氨乙基)-?-氨丙基三乙氧基硅烷(AEAPS)共同水

4、解得到的熒光(TRITC)納米顆粒表面帶有氨基基團，利用雙交聯(lián)劑戊二醛將熒光納米顆粒與單克隆anti-HER2抗體進行偶聯(lián)，該抗體可與對HER2高表達的人卵巢癌SKOV-3細胞發(fā)生抗體.抗原特異性反應(yīng)，因此制備了功能化的熒光納米顆粒，利用納米顆粒的熒光特性進而實現(xiàn)了對卵巢癌SKOV-3細胞的識別和早期檢測。結(jié)果表明：該熒光納米顆粒表面易于修飾抗體等生物分子且在一定濃度范圍內(nèi)與SKOV-3細胞具有良好的生物相容性；使用此熒光納米顆粒進行癌

5、細胞標記較之傳統(tǒng)的熒光染料分子標記方法在靈敏度、選擇性和熒光穩(wěn)定性等方面均有了較大的改善，有望成為生物檢測分析中的一種新型檢測技術(shù)。 3.利用銅(Ⅱ)溶液對熒光納米顆粒有明顯的熒光猝滅現(xiàn)象，構(gòu)建了一種檢測微量銅的新方法。該方法具有較好的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性，為銅的分析提供一種可供選擇的測定方法。本文對銅(Ⅱ)的檢測實驗條件進行了優(yōu)化選擇：采用pH6.0的磷酸鹽緩沖溶液(PBS)做底液，取新制的熒光納米顆粒懸浮液1mL(3g/L)，加入