稀土熒光二氧化硅納米顆粒及其在免疫分析中的應(yīng)用.pdf

1、近些年來(lái)，稀土熒光二氧化硅納米顆粒因?yàn)槠渚哂忻黠@的信號(hào)放大效應(yīng)得到了廣泛關(guān)注。不同于量子點(diǎn)和熒光染料等其他熒光標(biāo)記探針，稀土熒光二氧化硅納米顆粒具有發(fā)射帶窄，Stokes位移大，熒光壽命長(zhǎng)等特點(diǎn)，可以大大消除背景干擾，非常適用于熒光免疫分析中生物分子的熒光標(biāo)記，尤其是在農(nóng)獸藥殘留的快速免疫層析方面引起了越來(lái)越多的關(guān)注。作為熒光標(biāo)記探針，稀土熒光二氧化硅納米顆粒具備以下幾點(diǎn)特征:粒徑小，良好的親水性，良好的生物相容性，良好的穩(wěn)定性以及易離

2、心分離。本文利用微波輔助合成技術(shù)合成稀土熒光二氧化硅納米顆粒BHHCT-Eu3+@SiO2，對(duì)其進(jìn)行表征及熒光性能研究，并建立了一種快速高效的熒光免疫層析分析方法，用于牛奶樣品中硫酸卡那霉素（kanamycin，Kana）和磺胺類抗生素(sulfonamides，SAs)的檢測(cè)。
　　(1)采用微波輔助合成技術(shù)，制備了共價(jià)型BHHCT-Eu3+@SiO2熒光稀土二氧化硅納米顆粒，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化微波反應(yīng)時(shí)間、微波反應(yīng)功率、微波

3、反應(yīng)溫度和氨丙基三甲氧基硅烷(APTMs)與4，4'-二（1"，1"，1"，2"，2"，3"，3"-七氟-4"，6"-己二酮-6"-基）-氯磺酰-鄰-三聯(lián)苯(BHHCT)摩爾比對(duì)BHHCT-Eu3+@SiO2納米顆粒熒光性能的影響，通過(guò)透射電鏡(TEM)、X能譜分析(EDS)及傅里葉紅外光譜(FT-IR)對(duì)其結(jié)構(gòu)和形態(tài)進(jìn)行了表征，并研究了該方法制備的熒光納米顆粒的熒光性能。
　　(2)以微波輔助合成的BHHCT-Eu3+@SiO2

4、納米顆粒為熒光標(biāo)記探針，以醛基葡聚糖為交聯(lián)劑，將卡那霉素單克隆抗體(簡(jiǎn)稱Kana-ab)進(jìn)行熒光標(biāo)記，實(shí)現(xiàn)對(duì)卡那霉素殘留的熒光免疫層析分析。利用凝膠電泳成像技術(shù)結(jié)合熒光讀數(shù)儀優(yōu)化該熒光試紙條的制備條件，通過(guò)熒光讀數(shù)儀對(duì)卡那霉素的線性范圍和檢測(cè)限進(jìn)行檢測(cè)。該熒光免疫層析檢測(cè)方法對(duì)Kana的檢測(cè)限為0.85ng·mL-1，半抑制率(IC50)為12.76ng·mL-1，線性范圍為3.0-76ng·mL-1，添加回收率范圍為85.83％-99

5、.71％，RSD在3.11％-4.64％之間，與Kana類似物的交叉反應(yīng)均＜1％，與ELISA方法測(cè)定結(jié)果相關(guān)性良好。
　　(3)以微波輔助合成的BHHCT-Eu3+@SiO2納米顆粒為熒光標(biāo)記探針，合成磺胺單克隆抗體熒光標(biāo)記結(jié)合物，制備磺胺殘留熒光免疫層析試紙條，建立牛奶中磺胺類抗生素快速定量檢測(cè)體系。研究表明，建立的熒光免疫體系可以實(shí)現(xiàn)對(duì)SMM、SMD、SDM、SMR、SDT、SLPD、SMT、SD、SMZ、GMP、SMP和S