酪蛋白水解物Plastein反應(yīng)修飾產(chǎn)物降血壓和抗氧化活性的研究.pdf

1、研究利用中性蛋白酶水解酪蛋白獲得水解物(HC)，經(jīng)Plastein反應(yīng)分別在醇相和水相導(dǎo)入外源性氨基酸（Phe、Leu和Pro）獲得的Plastein反應(yīng)修飾產(chǎn)物分別為HCPHE-E、HCLEU-E、HCPRO-E、HCPHE、HCLEU和HCPRO。Plastein反應(yīng)修飾產(chǎn)物體外ACE抑制率與HC相比顯著增高，研究表明6種Plastein反應(yīng)修飾產(chǎn)物的ACE的抑制活性在不同溫度（20-120℃）、酸度(pH2-10)變化時穩(wěn)定，即具

2、有加工工藝穩(wěn)定性。且經(jīng)體外模擬胃腸道消化實驗后各Plastein反應(yīng)修飾產(chǎn)物的ACE抑制活性減弱，但仍具有良好的ACE抑制活性。
　　HC及Plastein反應(yīng)修飾產(chǎn)物對H2O2誘導(dǎo)人體臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)氧化損傷模型的保護(hù)作用:Plastein反應(yīng)修飾產(chǎn)可有效降低HUVEC在氧化損傷時的LDH滲出率、MDA生成量，與此同時可使SOD活力、GSH-Rd、CAT的活力顯著增強(qiáng)，而細(xì)胞內(nèi)GSH的含量變化不明顯，說明Plaste

3、in反應(yīng)修飾產(chǎn)物對H2O2誘導(dǎo)的HUVEC損傷具有良好保護(hù)作用，并存在劑量依賴關(guān)系。
　　HC及Plastein修飾產(chǎn)物對SHR大鼠血壓的影響:無創(chuàng)套尾法測定單次口服后的血壓結(jié)果表明導(dǎo)入外源性氨基酸為Phe或Pro體內(nèi)降血壓效果較好，口服后2h時HCPHE(HCPHE-E)和HCPRO(HCPRO-E)組與HC組差異顯著(P＜0.05)，ΔSBP和ΔDBP最高分別為-23.36±5.57 mmHg和-17.58±3.18 mmHg

4、，且通過對每日灌胃前血壓監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，Plastein反應(yīng)修飾產(chǎn)物對血壓的升高有良好的抑制作用。
　　HC及Plastein反應(yīng)修飾產(chǎn)物的體內(nèi)實驗:1）對體內(nèi)RAS系統(tǒng)的作用:試驗組血清中ACE、AngⅡ和醛固酮的表達(dá)水平低于陰性對照組，降低的最高比例分別為39.56％、39.60％和47.07％。SHR大鼠口服HCPHE，HCPHE-E、HCPRO和HCPRO-E后血清中ACE的水平與HC組相比分別降低28.64％、36.20％、2

5、9.23％和41.59％(P＜0.05)，ALD的表達(dá)水平與口服HC組相比均顯著下降(P＜0.05)，與體外ACE抑制率的測定結(jié)果無相關(guān)性。2）對體內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)的影響:HC組和Plastein反應(yīng)修飾產(chǎn)物組的SOD的活力變化區(qū)間為85.54±4.25U/mL-88.89±5.32 U/mL，與生理鹽水對照組(80.03±5.21U/mL)差異顯著(P＜0.05)。HC組和Plastein反應(yīng)修飾產(chǎn)物組的CAT活力比生理鹽水組活力增強(qiáng)

6、。口服HCPHE和HCPRO的SHR大鼠血清中T-AOC能力為別為10.23±2.10單位/mL血清，10.15±1.65單位/mL血清。較口服HC組升高23.84％和22.88％。
　　綜上，本試驗中所得經(jīng)中性蛋白酶水解所得到的酪蛋白水解物經(jīng)Plastein反應(yīng)后，所得到的Plastein反應(yīng)修飾產(chǎn)物具有良好的體外穩(wěn)定性及抗氧化能力。導(dǎo)入Phe和Pro的Plastein反應(yīng)修飾產(chǎn)物體內(nèi)降血壓活性強(qiáng)于HC，并在體內(nèi)有良好的抗氧化活