睪丸注射干擾Zfy基因?qū)d羊后代性別影響的研究.pdf

1、控制家畜的性別,生產(chǎn)出符合畜牧業(yè)生產(chǎn)需要性別的家畜,一直是畜牧業(yè)工作者研究的課題。綿羊性別控制對(duì)擴(kuò)大群體、快繁有著非常重要的作用。精子的發(fā)生過程受多方面體內(nèi)環(huán)境的控制和調(diào)節(jié)。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)Zfy基因是Y精子發(fā)生過程中的重要基因,利用RNAi技術(shù)干擾Zfy基因的表達(dá),限制甚至損害Y精子的結(jié)構(gòu)或功能發(fā)育,從而達(dá)到性別控制的目的。
　　目的:本研究采用質(zhì)粒載體介導(dǎo)的RNAi技術(shù)靶向抑制性別決定相關(guān)基因Zfy的表達(dá),研究綿羊后代性別比例的變化

2、。
　　方法:構(gòu)建質(zhì)粒載體pSilencer/Zfy-shRNA,大量制備重組質(zhì)粒并對(duì)公羊進(jìn)行睪丸打點(diǎn)注射,每隔7天注射1次,連續(xù)注射3次,最后一次注射后第5天,即注射載體第26天,每天采集公羊精液,連續(xù)17天,同時(shí)對(duì)超排母羊進(jìn)行人工授精,觀察后代的性別比例。
　　結(jié)果:對(duì)出生的216只羔羊的性別統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),睪丸注射載體第34天進(jìn)行配種所產(chǎn)羔羊母羔率達(dá)81.8％,顯著高于正常性別比例(P<0.05)。
　　結(jié)論:成功構(gòu)建