哈氏弧菌和溶藻弧菌亞單位偶聯(lián)疫苗的初步研究.pdf

1、分類號： ! ! 1 2 ：§! ±3U 1 ) c ： 5 2 1密級： 坌玨學(xué)校代碼：1 0 7 1 2研究生學(xué)號：S Y 2 0 0 4 0 2 2 5⑧西弛農(nóng)林針教大學(xué)2 0 0 7 屆攻讀碩士學(xué)位研究生學(xué)位( 畢業(yè)) 論文哈氏弧菌和溶藻弧菌亞單位偶聯(lián)疫苗的初步研究學(xué)科專業(yè)研究方向研究生指導(dǎo)教師完成時間預(yù)防獸醫(yī)學(xué)盆王疸厘堂皇魚瘴堂李華錢丞堡熬援昱邀勤班塞雖蠆在邀副嬰宜雖2 0 0 7 年6 月中國陜西楊凌S

2、T U D Y o N V I B R I o A L G I N o L Y T I C U S A N D H A R V E Y IS U B U N I T C o N J U G A T E V A C C I N EA B S T R A C TO u t e rm e m b r a n ep r o t e i nc o m p l e x ( O M P C ) w a se x t r a c t e df r o

3、m 礦h a r v e y i ，w h i c hw a s ∞l n ¨蜘i nd i f f e r e n t t e m p e r a t u r e a n ds a l t c o n c e n t r a t i o n ．D e n s i t yo f p r o t e i n w a s d e t e c t e d w i t h B r a n d f o r d ．T h e t e s

4、t e dr e s u l t s o fO M P C e x p r e s s i n g a n di m m u n o g e n i c i t ys h o w e dt h a t ：2 8 “ 1 2 a n d l m o l ／LN a C l i s t h e o p t i m a l c u l t u r ec o n d i t i o n ．L i p o p o l y s a e c h a

5、r i d e ( L P S ) w a se x t r a c t e df r o m 礦a l g i n o l y t i c u s , t h e nL P Sw a s c o n j u g a t e d t oO M P C b y 1 - e t h y l - 3 ( 3 - d i m e t h y l a m i n o p r o p y l ) c a r b o d i i m i d e (

6、E D C ) m e d i a t e dc o n d e n s a t i o n ．D u d n gt h es t u d y p e r i o d s ，T r a c h i n o t u s c v a t u s w e r e r e s p e c t i v e l y i m m u n i z e dw i t h t h e O M P C - L P S c o n j u g a t e s

7、，u n c o n j u g a t e dL P S ，u n c o n j u g a t e dO M P C ，s i m p l em i x t u r e o fL P Sa n dO M P C ( a l lg r o u p sw i t hD E A Ea d j u v a n t ) ，a n dp h y s i o l o g i c a ls a l ts o l u t i o ni n t h

8、es a m ep r o c e d u r e ．T h et e s t e dr e s u l t so fl y s o z y m ec o n t e n ts h o w e d t h a t ：n o s i g n i f i c a n td i f f e r e n c e w a sd e t e c t e d a m o n gt h ef o u r v a c c i n eg r o u p s

9、 ( p O ．0 5 ) ，b u tr e m a r k a b l ed i f f e r e n c ew a s o b s e r v e db e t w e e n v a c c i n eg r o u p sa n d c o n t r o lg r o u pr P < O ．0 5 ) ．A s r e f e r r i n g t ot h e a n t i - E p G S 0 2 1 0

10、 0 1a n t i b o d i e sf i t e r , i ta p p e a r e d e a r l i e ra n dh i g h e ri nO M P C —L P S c o n j u g a t e st h a nt h a t i nu n c o n j u g a t e dL P Sa n dt h e s i m p l e m i x t u r e ．A n da l s o ，t

11、h ea n t i —S p G Y 0 2 0 6 0 1a n t i b o d i e s i n O M P C - L P Sc o n j u g a t e sp r e s e n t e de a r l i e rw i t hh i g h e ra n t i b o d i e st i t e ra n d l a s t e dl o n g e rt h a nt h a ti nu n c o n

12、j u g a t e dO M P Ca n d t h es i m p l em i x t u r e ．I n a d d i t i o n ，t h ep r o t e c t i v ee f f i c i e n c yo f O M P C ·L P S c o n j u g a t e s ，u n c o n j u g a t e dL P S ，u n c o n j u g a t e dO

13、 M P C ，a n d s i m p l em i x t u r ew f f f ee v a l u a t e d ：C h a l l e n g e dw i t h E p G S 0 2 1 0 0 1a n d S p G Y 0 2 0 6 0 1 ，t h eR P S o f O M P C ·L P S c o n j u g a t e sg r o u pw a s8 5 ％a n d 9

14、5 ％r e s p e c t i v e l y , w h i c hw a s s i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h eg r o u p s o f a n c o n j u g a t e dL P S ( 7 0 ％) a n d u n c o n j u g a t e dO M P C ( 7 5 ％) ，∞d i d h i g h e rt h a n t

15、 h a to f t h es i m p l e m i x t u r e ( 8 0 ％a n d 8 2 ．5 ％) ．T h e n T r a c h i n o t u s c v a t u s w e r e r e s p e c t i v e l y i m m u n i z e dw i t h t h eO M P C —L P S c o n j u g a t e s ，c o n j u g a t

16、 e s w i t h I S A 7 6 3 a d j u v a n t , c o n j u g a t e s w i t h D E A Ea d j u v a n t , a n dp h y s i o l o g i c a ls a l ts o l u t i o ni nt h es a m ep r o c e d u r e ．A s t ot h ec h a l l e n g et e s t ,

17、 e v e r yg r o u pw a s d i v i d e di n t of o u r g r o u p s ：t h ef i r s tg r o u p w a sc h a l l e n g e dw i t h E p G S 0 2 1 0 0 1b y i n j e c t i n g t oa b d o m i n a lc a v i t y , t h es e c o n dg r o u

18、 pw a s d i p p i n gi n E p G S 0 2 1 0 0 1s o l u t i o n a f t e ri n f e c t e d w i t hp a r a s i t e ，a n dt h e o t h e rt w og r o u p sw a sr e s p e c t i v e l y c h a l l e n g e d w i t hS p G Y 0 2 0 6 0 1

19、 i n t h ea b o v e m e a n s ．T h e p r o t e c t i v e e f f i c i e n c y o f1 S A 7 6 3a d j u v a n tg r o u pw a s 9 0 ％a n d 7 0 ％r e s p e c t i v e l yc h a l l e n g e dw i t hE p G S 0 2 1 0 0 1 ，w h i c hw a

20、s h i g h e rt h a nt h eg r o u p so fD E A E a d j u v a n t ( 8 5 ％a n d5 5 ％) a n dn oa d j u v a n t ( 8 0 ％a n d5 5 ％) ．A n dt h eR P S o fI S A 7 6 3a d j u v a n tw a s a l s oh i g h e r t h a nt h eo t h e r g

21、r o u p sc h a l l e n g e dw i t hS p G Y 0 2 0 6 0 1 ．T h er e s u l t s s h o w e d t h a t ：t h i sc o n j u g a t e sh a d p o t e n t i a l i t yo fd e v e l o p i n gt ov a c c i n e ，a n dI S A 7 6 3e d j u v a n

22、 t c a l lb eu s e do n t h e r e s e a r c ho fs u b u n i tv a c c i n eo f 礦a l g i n o l y t i c u s a n d 礦h a r v e y tK E Y W O R D S ：H b r i o a l g i n o l y t i e u s ；H b r i oh a r v e y i ；l i p o p o l y s