溶藻弧菌生物膜形成特性及對(duì)藥物耐受性研究.pdf

1、溶藻弧菌是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中最常見的致病菌之一，由其引發(fā)的弧菌病常常給海水養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的損失，除此之外，溶藻弧菌還會(huì)引起人類的多種疾病。本文研究了溶藻弧菌生物膜形成特性，并比較了其對(duì)鏈霉素、慶大霉素、四環(huán)素、新霉素、卡那霉素、氧氟沙星和復(fù)方新諾明等7種水產(chǎn)常見藥物的耐受性，旨在通過(guò)體外溶藻弧菌生物膜的培養(yǎng)和藥物，建立體外誘導(dǎo)溶藻弧菌生物膜形成的方法，并探索抑制生物膜的方法，為治療溶藻弧菌導(dǎo)致的疾病提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　通過(guò)改良的微孔

2、板法研究致病性溶藻弧菌ND-01的生物膜形成特性。結(jié)果顯示，在28℃濕盒靜止培養(yǎng)16h左右，溶藻弧菌生物膜量達(dá)到峰值;菌液的初始密度在102～108CFU/mL范圍內(nèi)，對(duì)于成膜量影響不顯著;NaCl質(zhì)量濃度在4.5％時(shí)，生物膜量最大;pH值在7～8時(shí)，成膜量最高;培養(yǎng)溫度為30℃時(shí)，對(duì)溶藻弧菌的生物膜量的影響最顯著;加入1.5％的CaCl2能顯著促進(jìn)生物膜形成，而MgCl2則影響不顯著;經(jīng)過(guò)大黃魚表皮粘液包被后，形成的生物膜量顯著高于其

3、他各部分組織液包被組。這些研究結(jié)果表明:致病性溶藻弧菌ND-01在體外能形成穩(wěn)定而明顯的生物膜，其生物膜的形成和多種環(huán)境因素有著密切關(guān)系。
　　使用MTT法測(cè)定溶藻弧菌生物膜的活性，并證明了溶藻弧菌生物膜對(duì)幾種水產(chǎn)中常見抗生素藥物具有耐受性。研究表明:隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，溶藻弧菌生物膜膜內(nèi)菌體活性逐漸增大，24h之后開始趨于平穩(wěn)，但仍保持在較高水平;形成成熟生物膜后，其對(duì)抗生素的耐受性出現(xiàn)了顯著的增強(qiáng);氧氟沙星在較低濃度下對(duì)成熟期溶藻