整合子與志賀菌耐藥的相關(guān)性研究.pdf

1、志賀菌屬是導(dǎo)致感染性腹瀉的常見(jiàn)致病菌之一。隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，志賀菌耐藥情況日趨嚴(yán)重，給臨床治療帶來(lái)嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。目前研究表明，橫向獲得外源性耐藥基因是大多數(shù)細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性特別是多重耐藥(multidrug resistance，MDR)的主要原因之一。
　　 近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，在細(xì)菌，尤其是革蘭氏陰性菌中，一種可以捕獲并表達(dá)耐藥基因的新型克隆表達(dá)系統(tǒng)--整合子(integron，In)在細(xì)菌耐藥基因水平轉(zhuǎn)移機(jī)制中起了重要作用

2、。整合子主要由整合酶(integrase)基因(intI)、整合酶特異性重組位點(diǎn)attI和數(shù)目不定的耐藥基因盒(gene cassette)組成。耐藥基因盒由一個(gè)編碼抗生素抗性的開(kāi)放讀碼框(open reading frame，ORF)和一個(gè)整合位點(diǎn)attC組成，可以環(huán)形結(jié)構(gòu)獨(dú)立存在，也可整合入整合子中而成為整合子結(jié)構(gòu)的一部分。目前研究表明，1、2類(lèi)整合子與志賀菌多重耐藥密切相關(guān)。
　　 研究目的：分析天津地區(qū)志賀菌流行菌株血清

3、型、抗生素耐藥情況及耐藥變化趨勢(shì)；研究1、2類(lèi)整合子在天津地區(qū)志賀菌中檢出率及分布規(guī)律，分析其與志賀菌抗生素耐藥的相關(guān)性。
　　 材料與方法：對(duì)收集的志賀菌臨床株162株，其中129株(福氏志賀菌24株、宋內(nèi)志賀菌104株、鮑氏志賀菌1株)為2009和2010年5～9月從天津市三家三級(jí)甲等醫(yī)院腸道門(mén)診患者糞便標(biāo)本中分離的志賀菌臨床株及本研究所保存的33株(福氏志賀菌32株、宋內(nèi)志賀菌1株)分離自1981-1983年天津地區(qū)多家三

4、級(jí)甲等醫(yī)院的志賀菌臨床株，采用K-B法用16種臨床常用抗生素進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)，分析其耐藥變化趨勢(shì)，并通過(guò)PCR基因擴(kuò)增技術(shù)對(duì)1、2類(lèi)整合子在志賀菌中的分布情況、攜帶的耐藥基因盒的種類(lèi)及與耐藥的相關(guān)性進(jìn)行研究。
　　 結(jié)果：1981-1983年組志賀菌對(duì)四環(huán)素耐藥率最高，為93.94％，其次是氯霉素、鏈霉素、甲氧芐啶/磺胺甲噁唑，對(duì)3種及3種以上抗生素耐藥多重耐藥菌株占全部菌株的66.67％(22/33)，未發(fā)現(xiàn)三代頭孢菌素、氟喹

5、諾酮類(lèi)藥物及亞胺培南耐藥菌株；2009-2010年組志賀菌對(duì)氨芐西林耐藥率最高，為97.67％，其次是甲氧芐啶/磺胺甲噁唑、哌拉西林、四環(huán)素、鏈霉素和慶大霉素，3種及3種以上抗生素多重耐藥菌株為93.02％(120/129)，對(duì)三代頭孢菌素及氟喹諾酮類(lèi)藥物耐藥率分別為3.88～12.40％、1.55～2.33％，未發(fā)現(xiàn)亞胺培南耐藥株；1981-1983年組1類(lèi)整合子陽(yáng)性率為87.88％(29/33)，27株可變區(qū)含氨基糖苷類(lèi)藥物耐藥基因

6、aadA；1株宋內(nèi)志賀菌可變區(qū)含甲氧芐啶耐藥基因dfrA17和氨基糖苷類(lèi)藥物耐藥基因aadA5；未發(fā)現(xiàn)2類(lèi)整合子陽(yáng)性株；2009-2010年組1類(lèi)整合酶陽(yáng)性率為73.64％(95/129)，可變區(qū)及3’末端擴(kuò)增均陰性，基因盒擴(kuò)增顯示21株blaoxa-30和aadA陽(yáng)性，17株dfrA12擴(kuò)增陽(yáng)性；2類(lèi)整合子陽(yáng)性率62.79％(81/129)，可變區(qū)含dfrA1+sat1+aadA1，介導(dǎo)甲氧芐啶、鏈絲菌素和鏈霉素耐藥；其中62株1、2

7、類(lèi)整合酶同時(shí)陽(yáng)性。1類(lèi)整合子陽(yáng)性組對(duì)鏈霉素和氯霉素的耐藥率明顯高于1類(lèi)整合子陰性組(P<0.05)；2類(lèi)整合子陽(yáng)性組志賀菌屬對(duì)氨芐西林、哌拉西林、鏈霉素、慶大霉素和甲氧芐啶/磺胺甲噁唑的耐藥率均明顯高于2類(lèi)整合子陰性組(P<0.05)。
　　 結(jié)論：天津地區(qū)志賀菌流行株主要是宋內(nèi)志賀菌和福氏志賀菌，多重耐藥率達(dá)93.02％。1類(lèi)整合子廣泛存在于志賀菌屬中；2類(lèi)整合子僅由2009-2010年組志賀菌中檢出。整合子與志賀菌耐藥具有相