志賀菌分型與分子耐藥機(jī)制的研究.pdf

1、(第一部分) 為了解我國(guó)痢疾流行區(qū)志賀菌流行及耐藥情況，從流行區(qū)收集150株臨床分離志賀菌作血清分型與藥敏試驗(yàn)。結(jié)果表明志賀菌感染的治療不宜選用萘啶酸、奧格門丁、復(fù)合磺胺和氨芐青霉素，應(yīng)選慶大霉素、諾氟沙星或環(huán)丙沙星。根據(jù)生化反應(yīng)和顯微鏡形態(tài)觀察，26株血清學(xué)試驗(yàn)陰性的細(xì)菌可排除志賀菌。(第二部分) 氟喹諾酮類抗菌藥是目前臨床治療志賀菌感染的首選用藥，但志賀菌流行株對(duì)諾氟沙星和環(huán)丙沙星的耐藥率已分別達(dá)到15.5％和16.4％

2、。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，喹諾酮敏感福氏志賀菌的gyrA基因與標(biāo)準(zhǔn)株相比在4個(gè)位點(diǎn)上存在變異(G1176-A、T1491-C、A2432-G和T2586-C)，序列同源性達(dá)99.8％。4個(gè)堿基位點(diǎn)的變異中，僅A2432-G可造成氨基酸殘基的改變，即Glu811-Gly(E811-G)，兩株細(xì)菌GyrA氨基酸序列同源性達(dá)99.9％。由于該流行株對(duì)喹諾酮類敏感，推測(cè)Glu811-Gly與喹諾酮類耐藥無(wú)關(guān)。(第三部分) 根據(jù)喹諾酮敏感志賀菌gyr

3、A序列設(shè)計(jì)PCR引物擴(kuò)增包含上述喹諾酮類耐藥相關(guān)位點(diǎn)的gyrA基因片斷，用SSCP和測(cè)序等方法檢查喹諾酮類耐藥株是否存在gyrA基因突變，并采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法檢驗(yàn)突變與喹諾酮類耐藥的相關(guān)性。測(cè)序結(jié)果顯示志賀菌流行株存在兩類gyrA突變：C42-T單位點(diǎn)突變(Ser83-Leu)和C42-T&A54-G雙位點(diǎn)突變(Ser83-Leu&Asp87-Gly)?？ǚ綑z驗(yàn)顯示C42-T突變與志賀菌流行株耐受萘啶酸相關(guān)，而A54-G突變與志賀菌流行株耐