肺炎克雷伯菌臨床分離株的整合子與多重耐藥性研究.pdf

1、目的：
　　了解重慶市某醫(yī)院肺炎克雷伯菌臨床分離株的耐藥現(xiàn)狀、整合子種類和耐藥基因盒流行狀況，探討整合子-基因盒系統(tǒng)與細(xì)菌獲得性耐藥之間的關(guān)聯(lián)。
　　方法：
　　以PCR擴(kuò)增178株肺炎克雷伯菌株中整合酶基因（intI）的方式對整合子進(jìn)行篩選；紙片擴(kuò)散法了解菌株的耐藥情況；擴(kuò)增 intI陽性株的可變區(qū)（VR），并選取電泳條帶大小相近的產(chǎn)物進(jìn)行測序分析；借助質(zhì)粒接合轉(zhuǎn)移試驗(yàn)推測整合子在細(xì)菌之間通過性菌毛進(jìn)行水平轉(zhuǎn)移的潛力

2、；使用MLST對菌株進(jìn)行同源性分析，同時(shí)檢測整合子可變區(qū)（VR）陽性菌中的強(qiáng)毒性血清型菌株。
　　結(jié)果：
　　PCR篩選結(jié)果顯示，intI1和 intI2陽性率分別為60.1%（109/178）和1.7%（2/178），未檢出intI3；通過對藥敏和PCR篩選結(jié)果的統(tǒng)計(jì)分析能夠看出，intI的攜帶與肺炎克雷伯菌多重耐藥的形成有一定的聯(lián)系；intI陽性菌株的VR陽性率為39.6%（44/111），其中，與甲氧芐啶和氨基糖苷類抗

3、性相關(guān)的dfr和aad家族基因盒在數(shù)量上占優(yōu)勢；88.6%（39/44）的VR陽性整合子位于接合性質(zhì)粒；通過MLST將VR陽性株劃分為13種序列型（STs），以ST11和ST15為主，eBURST分析表明ST11和ST437屬于CC258，其兩者互為SLV，其余11個(gè)ST型為單體。通過PCR檢測出4種（K1、K2、K20和K54）強(qiáng)毒性血清型，其陽性率分別為14.2%、9.4%、6.5%、和4.2%，其中，ST23為K1血清型中常見的序