瘦素和瘦素受體基因單核苷酸多態(tài)性與系統(tǒng)性紅斑狼瘡遺傳易感性的關聯(lián)研究.pdf

1、研究背景：
　　系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic lupus erythematosus，SLE）是一種以產生大量自身抗體、累及多系統(tǒng)臟器、出現(xiàn)免疫復合物沉積為主要特征的結締組織疾病，同時也是一種系統(tǒng)性的自身免疫性疾病。該疾病不僅會影響血管壁、皮膚等組織，同時還會造成關節(jié)、腎臟、血液系統(tǒng)及神經系統(tǒng)的改變。目前認為在不同地區(qū)和不同種族間SLE的發(fā)病率存在一定的差異，且男女性別間SLE發(fā)病率也存在較大差異。SLE患者中90%以上為女性

2、，發(fā)病年齡多集中在25~45歲，目前我國女性SLE發(fā)病率約為110/10萬，嚴重地影響了育齡期女性的身心健康。SLE的病因和發(fā)病機制至今尚未明確，可能是受遺傳因素和環(huán)境因素的雙重影響。
　　瘦素是一種由瘦素基因（leptin gene, LEP）編碼產生的蛋白質，參與體內多種免疫炎癥過程。瘦素可以通過與瘦素受體結合形成二聚體，激活JAK2/SATA3和mTOR信號通路從而影響免疫系統(tǒng)功能；瘦素也可以促進T細胞增殖，抑制T細胞凋亡，

3、誘導白細胞介素1（interleukin1，IL-1）、IL-6、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factorα，TNF-α）等多種細胞因子的表達，同時促進輔助T細胞向Th1細胞轉變，從而參與免疫調節(jié)過程。近期研究認為瘦素基因、瘦素受體基因（leptin receptor gene, LEPR）多態(tài)性及瘦素的表達水平與SLE、類風濕關節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）等多種自身免疫性疾病的發(fā)生、發(fā)展存在

4、關聯(lián)。目前，關于SLE患者體內瘦素表達水平變化與疾病之間的關聯(lián)研究結果尚有爭議，且在中國漢族人群中開展的瘦素和瘦素受體基因多態(tài)性與 SLE遺傳易感性的關聯(lián)研究非常有限。
　　目的：
　　探討 LEP和 LEPR基因單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism, SNP）與中國漢族人群SLE患者遺傳易感性間的關聯(lián)，分析LEP、LEPR基因相關SNP與SLE患者主要臨床表現(xiàn)之間的關聯(lián)，并比較LEP

5、、LEPR基因相關SNP與SLE患者血清瘦素表達水平的聯(lián)系。
　　方法：
　　本課題采用病例對照研究方法，選取SLE患者633例，來源于安徽醫(yī)科大學附屬省立醫(yī)院、安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院和安慶市立醫(yī)院三家醫(yī)院風濕免疫科的門診或住院患者，病例診斷依據美國風濕病學會1997年修訂的SLE分類標準。選取健康對照559例，來源于安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院健康體檢中心健康體檢者。采用多重高溫連接酶檢測反應技術（improved mult

6、iple ligase detection reaction，iMLDR）進行基因分型檢測，對 LEP基因4個位點（rs11761556，rs12706832，rs2071045，rs2167270）以及 LEPR基因9個位點（rs10749754，rs1137100，rs1137101，rs13306519，rs1805094，rs1805096，rs3790434，rs3806318，rs7518632）的單核苷酸多態(tài)性進行分析。采

7、用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）測定SLE患者血清瘦素表達水平。
　　結果：
　　瘦素及瘦素受體基因的13個多態(tài)性位點的基因型頻率及等位基因頻率在SLE患者與健康對照之間的差異均無統(tǒng)計學意義（均有P>0.05），調整性別和年齡后發(fā)現(xiàn)LEPR rs1137100位點基因型頻率分布在兩組間的差異存在統(tǒng)計學意義（GG vs. AA：χ2=3.904，P=0.048

8、，OR=1.948，95%CI：1.005-3.776）。同時，進一步分析了顯性模型、隱性模型和相加模型等遺傳模型在病例組與對照組之間的分布，兩者之間的分布差異也均無統(tǒng)計學意義（均有P>0.05）。調整性別和年齡后發(fā)現(xiàn)LEPR rs1137100位點的隱性模型及相加模型在兩組間的差異分布存在統(tǒng)計學意義（GA+GG vs. AA：χ2=4.365，P=0.037，OR=0.496，95% CI：0.257-0.958；GG vs. AA：

9、χ2=3.871，P=0.049，OR=0.514，95%CI：0.265-0.997）。
　　對基因多態(tài)性與臨床表現(xiàn)之間的關聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)，LEP基因rs2071045位點在伴有心包炎的SLE患者中，其TT基因型頻率及T等位基因頻率高于未伴有心包炎的SLE患者（χ2=8.811，P=0.012；χ2=6.432，P=0.011）。rs11761556位點等位基因頻率與 SLE患者是否伴隨顴部紅斑之間存在統(tǒng)計學關聯(lián)（χ2=4.067，

10、P=0.044）。LEPR基因rs3806318位點基因型及等位基因頻率分布與SLE患者是否伴有光敏感之間具有統(tǒng)計學關聯(lián)，SLE同時伴有光敏感者其GG和GA基因型頻率以及G等位基因頻率高于SLE未伴有光敏感者（χ2=8.693，P=0.013；χ2=6.948，P=0.008）。同時，該位點基因型頻率還與SLE患者中關節(jié)炎的發(fā)生存在統(tǒng)計學關聯(lián)（χ2=6.204，P=0.045）。另外，在SLE合并光敏感的患者中，rs1137100位點

11、AA和 GA基因型頻率及 A等位基因頻率高于未合并光敏感的患者（χ2=6.272，P=0.043；χ2=5.609，P=0.018）。
　　單倍型分析發(fā)現(xiàn)，LEPR基因的9個位點構建的單倍型中，SLE病例組ACGCAGCAA單倍型頻率低于對照組（χ2=9.038，P=0.003，OR=0.745，95%CI：0.615-0.903）；而ATGCAGCAA單倍型結構在SLE病例組中的頻率高于健康對照組（χ2=4.327，P=0.03

12、8，OR=1.390，95%CI：1.018-1.897）。SLE患者的瘦素血清表達水平與13個位點單核苷酸多態(tài)性之間均無統(tǒng)計學關聯(lián)（均有P>0.05）。
　　結論：
　　瘦素和瘦素受體基因的13個位點SNP與SLE遺傳易感性無統(tǒng)計學關聯(lián)，但調整性別、年齡后發(fā)現(xiàn)LEPR rs1137100位點基因型頻率在兩組中分布存在差異，且SLE患者不同瘦素和瘦素受體基因型下的的血清瘦素表達水平差異無統(tǒng)計學意義，但部分位點SNP可能與該疾