ITGAM基因單核苷酸多態(tài)性與中國漢族系統(tǒng)性紅斑狼瘡的相關(guān)性分析.pdf

1、背景:系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)是一種慢性自身免疫性疾病，常累及多系統(tǒng)多器官、病程遷延反復(fù)?；颊咦钔怀鎏卣魇敲庖呦到y(tǒng)的紊亂和自身抗體的大量產(chǎn)生。系統(tǒng)性紅斑狼瘡有明顯的遺傳易感性。最近國際上多個研究小組通過病例對照研究，發(fā)現(xiàn)整合素ITGAM(又稱為CD11b)外顯子3中的單核苷酸位點(R77H) rs1143679與多種人群中的SLE易感性密切相關(guān)，該突變體使SLE病人臨床表現(xiàn)更加嚴

2、重，伴有更多的自身抗體。但迄今為止，缺乏中國漢族人群的ITGAM基因多態(tài)性與臨床SLE病人表型相關(guān)性的研究報道，且機制未明。
　　美國嚴俊小組采用條件型基因敲除CD11b技術(shù)，在動物和細胞水平證實了CD11b參與了對自身反應(yīng)性B細胞的負向調(diào)節(jié)功能，該部分結(jié)果已發(fā)表在naturecommunications雜志上。為了在臨床患者中得到驗證，本研究小組和美國嚴俊小組合作申報了國家自然基金（編號81228018）。我們希望從臨床方面通過

3、分析大量SLE患者的CD11b基因多態(tài)性，綜合臨床資料，分析狼瘡患者的CD11b基因型和臨床表型間的關(guān)系，以及B細胞功能的改變。這將為闡明系統(tǒng)性紅斑狼瘡的發(fā)病機制，開發(fā)以CD11b為靶點的基因工程藥物奠定堅實的基礎(chǔ)。
　　一、中國漢族系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者中ITGAM基因單核苷酸多態(tài)性分析
　　目的：分析中國漢族系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者中ITGAM基因rs1143679的單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide p

4、olymorphism，SNP），并闡明該SNP與SLE臨床表型的相關(guān)性。方法：采用病例對照的研究方法，應(yīng)用PCR-RFLP以及直接測序技術(shù)對中國漢族人群中984例系統(tǒng)性紅斑狼瘡和928例健康對照進行多態(tài)性檢測，分析基因型和等位基因頻率的分布差異，并與臨床表型進行相關(guān)性分析。結(jié)果：(1)SLE患者中ITGAM rs1143679A等位基因頻率為1.17％，大大低于歐美國家的基因型頻率，與日本及泰國地區(qū)接近。(2) ITGAM rs114

5、3679 AG基因型與SLE易感性、狼瘡腎炎，抗心磷脂抗體有相關(guān)性（P＜0.05），而與皮膚紅斑、光過敏、口腔潰瘍、漿膜炎、關(guān)節(jié)炎表現(xiàn)、血液系統(tǒng)表現(xiàn)、神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)以及SLEDA沒有統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。結(jié)論：ITGAM rs1143679 SNP與中國漢族人群系統(tǒng)性紅斑狼瘡易感性有關(guān)，并可能參與了狼瘡腎炎的發(fā)生發(fā)展。
　　二 ITGAM突變SLE患者B細胞上CD11b的改變及其凋亡
　　目的:探討ITGAM突變對于SL

6、E患者B細胞表達CD11b以及其凋亡的意義。
　　方法:采用流式細胞術(shù)檢測11例ITGAM突變SLE患者外周血B細胞CD11b表達和其凋亡率，并與11例非突變SLE患者、11例健康對照組進行比較。結(jié)果:(1)突變組活動期表達CD11b的B淋巴細胞百分率為（32.6±5.4）％，與未突變組（35.2±6.5）％差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.32)，但與健康對照組（25.6±4.9）％比較，表達均上調(diào)(P=0.01);緩解期B淋巴細胞CD