苜蓿皂苷對(duì)大鼠膽固醇代謝的影響及其調(diào)控機(jī)理.pdf

1、為了研究苜蓿皂苷對(duì)大鼠膽固醇代謝的影響，并初步探討其代謝。本試驗(yàn)以SD大鼠、BRL肝細(xì)胞、ANA-1巨噬細(xì)胞為研究對(duì)象，從個(gè)體水平上研究了苜蓿皂苷對(duì)膽固醇代謝的影響、從細(xì)胞和分子水平上研究了苜蓿皂苷降低膽固醇的機(jī)理，具體情況如下:
　　試驗(yàn)一:苜蓿皂苷對(duì)大鼠膽固醇代謝的影響。取雄性健康SD大鼠32只，隨機(jī)分為4組，分別為:正常對(duì)照組、苜蓿皂苷組、高脂模型組和高脂皂苷組，每組8只。前四周為高脂模型建立期，后四周為灌胃期，正常對(duì)照組和

2、苜蓿皂苷組飼喂基礎(chǔ)飼糧，其余2組飼喂高脂飼糧，苜蓿皂苷組和高脂皂苷組從第5周開(kāi)始灌胃240mg/kg苜蓿皂苷，灌胃四周。測(cè)定試驗(yàn)大鼠體重、肝臟系數(shù)、血脂水平、糞便和肝臟中的膽固醇、膽汁酸含量。結(jié)果表明:(1)苜蓿皂苷顯著降低高脂大鼠體重、肝臟系數(shù);降低血清中總膽固醇含量，加速膽固醇向肝臟的聚集;增加糞便中膽固醇和膽汁酸的排出。(2)苜蓿皂苷顯著增加正常血脂水平大鼠糞便中膽固醇的含量，但對(duì)體重、肝臟系數(shù)等影響不大。提示苜蓿皂苷能夠調(diào)節(jié)大鼠

3、體內(nèi)膽固醇的分布，加速機(jī)體內(nèi)膽固醇的排泄，具有良好的降血脂效應(yīng)。
　　試驗(yàn)二:苜蓿皂苷調(diào)控大鼠膽固醇代謝的分子機(jī)理研究。為了探討苜蓿皂苷降低膽固醇的分子機(jī)理，本試驗(yàn)測(cè)定了SD大鼠膽固醇代謝、轉(zhuǎn)運(yùn)和分泌代謝過(guò)程中一系列基因mRNA表達(dá)量的變化（試驗(yàn)動(dòng)物、分組、試驗(yàn)期等同試驗(yàn)一）;為了排除環(huán)境、動(dòng)物機(jī)體代償性調(diào)節(jié)等因素的影響，采用細(xì)胞培養(yǎng)的方法測(cè)定了BRL大鼠肝細(xì)胞中一系列基因mRNA表達(dá)量的變化。同時(shí)，為了研究苜蓿皂苷對(duì)膽固醇逆向轉(zhuǎn)

4、運(yùn)的影響，構(gòu)建了ANA-1小鼠巨噬細(xì)胞荷脂細(xì)胞模型，并測(cè)定了ABCA1、SR-B1 mRNA表達(dá)量的變化。結(jié)果表明:(1)苜蓿皂苷顯著升高正常大鼠肝臟LDLR、ABCG5/ABCG8、SR-B1 mRNA表達(dá)量，加速大鼠體內(nèi)膽固醇的轉(zhuǎn)運(yùn)與分泌。(2)苜蓿皂苷顯著提高高脂大鼠肝臟LDLR、ABCA1、ABCG5/ABCG8、CYP7A1mRNA表達(dá)量，加速體內(nèi)膽固醇向肝臟的轉(zhuǎn)移、加速中性膽固醇的分泌、加速膽固醇向膽汁酸的轉(zhuǎn)變，從而加速動(dòng)物

5、體內(nèi)膽固醇的排泄。(3)正常BRL大鼠肝細(xì)胞LDLR、ABCA1、 ABCG5/ABCG8mRNA表達(dá)量上升，CYP7A1 mRNA表達(dá)量也上升，其結(jié)果與正常大鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果相近，而苜蓿皂苷對(duì)BRL大鼠脂變肝細(xì)胞各基因的影響不大，與高脂大鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果有所不同。(4)苜蓿皂苷對(duì)ANA-1小鼠巨噬細(xì)胞ABCA1、SR-B1 mRNA表達(dá)量影響不大。提示:(1)苜蓿皂苷降低動(dòng)物體內(nèi)膽固醇的含量可能與增加LDLRmRNA表達(dá)量加速膽固醇向肝臟

6、的轉(zhuǎn)運(yùn)、增加ABCG5/ABCG8mRNA表達(dá)量加速中性膽固醇的分泌、增加CYP7A1 mRNA表達(dá)量加速膽固醇向膽汁酸的轉(zhuǎn)變，從而加速動(dòng)物機(jī)體內(nèi)膽固醇的排泄有關(guān)。(2)苜蓿皂苷對(duì)高脂大鼠LDLR、CYP7A1等基因表達(dá)影響顯著，而對(duì)脂變BRL肝細(xì)胞影響不大，說(shuō)明苜蓿皂苷對(duì)高脂大鼠的影響是間接的，可能是代償性的，也可能是通過(guò)激素等其他因素發(fā)揮作用，具體原因需要進(jìn)一步研究。(3)苜蓿皂苷對(duì)巨噬細(xì)胞膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)影響不大，主要是影響肝細(xì)胞中