靜脈血栓栓塞癥患者D-二聚體檢測方法的研究.pdf

1、目的:血漿D-二聚體(D-dimer)是交聯(lián)的纖維蛋白在纖溶酶水解的作用下產(chǎn)生的可溶性降解終產(chǎn)物，是反映機(jī)體內(nèi)高凝狀態(tài)、血栓形成及纖溶活性的重要標(biāo)志物。臨床上多采用酶聯(lián)免疫吸附法、免疫比濁法等檢測血漿D-二聚體的含量。D-二聚體的抗原決定簇存在于含有D區(qū)的交聯(lián)的纖維蛋白降解產(chǎn)物中，免疫比濁法檢測D-二聚體時，單克隆抗體不僅特異地識別了D-二聚體的抗原決定簇，還和高分子量的交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物有交叉反應(yīng)。也就是說臨床中免疫比濁法測得的是交

2、聯(lián)的纖維蛋白降解產(chǎn)物的總蛋白量，并不是單純D-二聚體的量。本研究將采用蛋白免疫印跡技術(shù)(Westernblot)及免疫比濁法檢測血漿D-二聚體的表達(dá)情況。
　　 方法:選取大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院呼吸科2009年至2010年期間住院確診靜脈血栓栓塞癥(Venousthromboembolism，VTE)患者50例作為VTE組;選取無血栓病史及家族史的門診健康體檢者50例為健康對照組;選取晚期妊娠者(妊娠＞28周)50例為妊娠組;

3、選取同期腫瘤內(nèi)科住院確診惡性腫瘤、無靜脈血栓血栓癥的患者50例為惡性腫瘤組，以上每例患者分別取血漿一份，采用蛋白免疫印跡技術(shù)(Westernblot)、免疫比濁法檢測VTE組、妊娠組及惡性腫瘤組的血漿D-二聚體的表達(dá)情況，并與健康對照組進(jìn)行對比。
　　 結(jié)果:
　　 1.Westernblot檢測結(jié)果顯示，血漿D-二聚體在VTE組(1.2015±0.8829)的表達(dá)明顯高于健康對照組（0.6479±0.3679），(Z=

4、-2.686，P=0.007)，差異具有顯著性。妊娠組（0.9345±0.6148）高于健康對照組(t=-2.045,P=0.046)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。惡性腫瘤組（1.1812±1.0340）高于健康對照組（Z=-2.058，P=0.040），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。VTE組與妊娠組、惡性腫瘤組比較，檢驗(yàn)統(tǒng)計量分別為Z=-0.844、Z=-0.038，P值分別為P=0.399，P=0.970，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。Westernblot檢測VT

5、E患者D-二聚體的靈敏度是52％，特異度是92％。
　　 血漿高分子量交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物FDP在VTE組（4.2263±2.4011）的表達(dá)高于健康對照組（2.0345±0.7473）（Z=-4.656，P=0.000），差異具有顯著性。妊娠組(3.0790±1.7069)高于健康對照組（Z=-2.044，P=0.041），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。惡性腫瘤組(3.2498±2.1437)高于健康對照組(Z=-2.052，P=0.04

6、0)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。VTE組高于妊娠組及惡性腫瘤組，檢驗(yàn)統(tǒng)計量分別為Z=-1.965、Z=-1.998，P值分別為P=0.049，P=0.046，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。Westernblot檢測VTE患者血漿高分子量交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物FDP的靈敏度是58％，特異度是80％。
　　 D-二聚體與高分子量交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物FDP的比值，VTE組（0.3318±0.1284）高于健康對照組（0.2640±0.0882）（Z=-1.

7、980，P=0.048），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。妊娠組(0.3955±0.0715)高于健康對照組（Z=-4.038，P=0.000），差異具有顯著性。惡性腫瘤組(0.4048±0.0867)高于健康對照組(Z=-4.215，P=0.000)，差異具有顯著性。妊娠組、惡性腫瘤組高于VTE組，檢驗(yàn)統(tǒng)計量分別為t=-2.343、t=-2.053，P值分別為P=0.025，P=0.044，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。Westemblot檢測VTE患者血漿D

8、-二聚體與高分子量交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物FDP的比值，其靈敏度是50％，特異度是74％。
　　 2.免疫比濁法檢測結(jié)果顯示，血漿D-二聚體在VTE組中的濃度(468.04±374.17ng/ml)高于健康對照組(137.18±183.41ng/ml)(Z=-4.708，P=0.000)，差異具有顯著性。妊娠組(257.21±201.95ng/ml)高于健康對照組(Z=-2.876，P=0.004)，差異具有顯著性。惡性腫瘤組(29

9、9.42±432.50ng/ml)高于健康對照組(Z=-2.902，P=0.004)，差異具有顯著性。VTE組高于妊娠組及惡性腫瘤組，檢驗(yàn)統(tǒng)計量分別為Z=-2.351、Z=-2.508，P值分別為P=0.019，P=0.012，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。免疫比濁法檢測VTE患者血漿D-二聚體的靈敏度是60％，特異度是92％。
　　 結(jié)論:
　　 1.通過蛋白免疫印跡技術(shù)證實(shí)，臨床常用的免疫比濁法檢測血漿D-二聚體水平，其單克隆抗