基于iTRAQ技術(shù)的子癇前期子代血管功能紊亂的定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、本文從以下兩部分進(jìn)行論述：
　　第一部分 基于iTRAQ-2D-LC-MS/MS的子癇前期子代臍動脈血管的蛋白質(zhì)組學(xué)分析
　　流行病學(xué)調(diào)查顯示子癇前期對母親和胎兒的健康都有重大影響，宮內(nèi)的不良環(huán)境可能導(dǎo)致成人心血管疾病的發(fā)生，但對其分子機(jī)制知之甚少。因此，我們利用定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)試圖深入的研究子癇前期子代心血管功能紊亂的分子機(jī)制。iTRAQ結(jié)果顯示我們總共鑒定到1521個蛋白質(zhì)，其中1496個蛋白質(zhì)具有定量信息。進(jìn)一步分析

2、得到在臍動脈血管中有53個具有顯著差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，其中22個蛋白質(zhì)上調(diào)表達(dá)，31個蛋白質(zhì)下調(diào)表達(dá)。通過利用IPA軟件進(jìn)行深入的生物信息學(xué)分析，我們發(fā)現(xiàn)了一組與心血管密切相關(guān)的蛋白質(zhì)(SLIT3,CD99,FN1,DAPK3,CRKL,FBN1,C1 QBP,CSNK2B,AKR1B1,TMOD1,LRPAP1，F(xiàn)BN2，PRKCA)，這些蛋白質(zhì)與心血管疾病和功能密切相關(guān)，功能方面主要是與血管生成（angiogenesis）最為相關(guān)，相

3、關(guān)疾病方面則是跟高血壓(hypertension)聯(lián)系最為密切。我們對AKR1B1，F(xiàn)N1，F(xiàn)BN1這三個蛋白質(zhì)進(jìn)行了western blot的驗證，結(jié)果與蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)果一致。在對這些心血管功能相關(guān)蛋白的上游調(diào)控分析中，我們發(fā)現(xiàn)miR-9-5p可以抑制AKR1B1，F(xiàn)BN1，F(xiàn)BN2，PRKCA這四個蛋白的表達(dá)。心血管功能相關(guān)蛋白的相互作用網(wǎng)絡(luò)顯示FN1蛋白處于軸心位置。研究結(jié)果對揭示子癇前期子代的血管功能紊亂提供了新的研究視角。

4、>　　第二部分 基于子癇前期動物模型的成年子代血管的蛋白質(zhì)組學(xué)分析
　　心血管疾病的胚胎起源是全世界備受重視的研究領(lǐng)域。流行病學(xué)調(diào)查顯示子癇前期所造成的宮內(nèi)不良環(huán)境會導(dǎo)致胎兒的血管功能出現(xiàn)不同程度的紊亂，從而加大了子代發(fā)育過程中心血管疾病發(fā)生的風(fēng)險，但其分子機(jī)制仍有待研究。在前期研究中，我們分析了子癇前期子代的臍動脈差異蛋白表達(dá)譜，為了更深入的研究子癇前期子代成年后的血管功能變化，我們建立了子癇前期的動物模型，喂養(yǎng)子代至成年（1年

5、）后，我們收集其胸主動脈進(jìn)行定量蛋白質(zhì)組學(xué)的研究。iTRAQ結(jié)果顯示我們總共鑒定到1825個蛋白質(zhì)，進(jìn)一步分析可知有106個具有顯著差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，其中75個蛋白質(zhì)上調(diào)表達(dá)，31個蛋白質(zhì)下調(diào)表達(dá)。通過IPA軟件的疾病與功能分析，我們發(fā)現(xiàn)差異表達(dá)蛋白中有20個心血管疾病和功能都有明顯相關(guān)性。其中血管生成(angiogenesis)是心血管相關(guān)功能中最為密切的，相關(guān)疾病方面則是跟動脈阻塞(occlusion of artery)和動脈粥樣