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文檔簡介
1、食管癌是最常見的惡性腫瘤之一,死亡率位于所有惡性腫瘤的第6位。其分布遍及世界各地,我國發(fā)病率居全世界之首,其發(fā)病率和死亡率在我國全部惡性腫瘤中均居第四位。目前,外科手術(shù)仍然是食管癌的主要治療手段。雖然已經(jīng)做了大量的工作來提高食管癌的治愈率,但食管癌的診斷和治療效果仍難以令人滿意。早期診斷和合理治療是降低食管癌患者死亡率的有效措施,但在醫(yī)院接受治療的食管癌患者大多數(shù)處于較晚期,總體治療效果不佳。有效的早期分子標(biāo)志物將為臨床上食管癌的早期診
2、斷提供新的參考資料,但目前尚未找到十分有價(jià)值的用于食管癌早期診斷與治療的分子標(biāo)志物。
隨著人類基因組計(jì)劃的完成,蛋白質(zhì)組學(xué)已成為后基因時(shí)代的研究熱點(diǎn)。蛋白質(zhì)是基因功能的體現(xiàn)者,許多疾病過程均在蛋白質(zhì)水平有所體現(xiàn),腫瘤細(xì)胞的突變最終要通過轉(zhuǎn)錄和翻譯成蛋白質(zhì)來實(shí)現(xiàn)其表型。因此,蛋白質(zhì)組學(xué)可從一個(gè)新的角度來闡明腫瘤發(fā)生機(jī)理,將為食管癌的診斷和治療提供新的參考依據(jù)。
目的:⑴探討影響胸中段食管鱗癌(Esophagea
3、l squamous cell carcinoma,ESCC)的預(yù)后的臨床病理因素及合理的淋巴結(jié)清掃范圍;⑵聯(lián)合應(yīng)用雙向凝膠電泳(2-DE)和基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)分析技術(shù)篩選食管鱗癌相關(guān)蛋白;⑶應(yīng)用酶鏈免疫法(ELISA)驗(yàn)證候選蛋白,證明蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)篩選出的相關(guān)蛋白點(diǎn)結(jié)果可靠。
方法:①對(duì)129例經(jīng)現(xiàn)代二野淋巴結(jié)清掃術(shù)的胸中段食管鱗癌患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析,探討影響胸中段食
4、管鱗癌預(yù)后的臨床因素及合理的淋巴結(jié)清掃范圍;②應(yīng)用雙向凝膠電泳技術(shù)建立正常人及食管鱗癌患者(Ⅰ~Ⅲ期)血清蛋白質(zhì)指紋圖譜;③分析對(duì)比正常人及食管鱗癌患者(Ⅰ~Ⅲ期)蛋白質(zhì)指紋圖譜,篩選出差異表達(dá)蛋白點(diǎn);④應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(Matrix-Assisted LaserDesorption/Ionization Mass Spectrometric Analysis time-of-flightmass spectrome
5、try,MALDI-TOF-MS)分析技術(shù)對(duì)篩選出的差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行分析鑒定;⑤應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)候選蛋白結(jié)合珠蛋白(Haptoglobin,HP)和血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid A,SAA)在食管鱗癌患者和正常人血清中的表達(dá)差異。
結(jié)果:⑴COX模型多因素生存分析顯示腫瘤長度、浸潤深度、細(xì)胞分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移度對(duì)預(yù)后有顯著影
6、響;⑵聯(lián)合應(yīng)用雙向凝膠電泳和基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜分析技術(shù)發(fā)現(xiàn),有2個(gè)蛋白點(diǎn)食管鱗癌患者血清中表達(dá)下調(diào),分別為:甲狀腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(transthyretin,TTR)和過氧化物還原酶Ⅱ(PeroxiredoxinⅡ);⑶聯(lián)合應(yīng)用雙向凝膠電泳和基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜分析技術(shù)發(fā)現(xiàn),有2個(gè)蛋白點(diǎn)在食管鱗癌患者血清中表達(dá)上調(diào),分別為:結(jié)合珠蛋白和血清淀粉樣蛋白A;⑷聯(lián)合應(yīng)用雙向凝膠電泳和基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜分析技
7、術(shù)發(fā)現(xiàn),有2個(gè)蛋白點(diǎn)僅在局部晚期食管癌患者血清中表達(dá)上調(diào),分別為:載脂蛋白A1(Apolipoprotein A-1,Apo-A1)和細(xì)胞角蛋白1(Cytokeratin1).;⑸酶聯(lián)免疫法檢測(cè)顯示,結(jié)合珠蛋白在食管鱗癌患者血清中表達(dá)明顯上調(diào),其表達(dá)量與食管鱗癌分期無關(guān);⑹酶聯(lián)免疫法檢測(cè)顯示,血清淀粉樣蛋白A在食管鱗癌患者血清中表達(dá)明顯上調(diào),其表達(dá)量隨食管鱗癌分期后移而逐漸上調(diào)。
結(jié)論:①腫瘤長度、浸潤深度、細(xì)胞分化程度及
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