應(yīng)用mRNA差異顯示技術(shù)研究藥物誘導(dǎo)小鼠紅白血病細(xì)胞沿紅系分化過程中基因表達(dá)的變化.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文應(yīng)用mRNA差異顯示技術(shù)研究藥物誘導(dǎo)小鼠紅白血病細(xì)胞沿紅系分化過程中基因表達(dá)的變化姓名：陳渝萍申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：薛社普劉德培1999.6.1主鎏墊塑蔓登鲞蘭簦圭蘭壁燕塞!我們接著采用了殷向Northern點(diǎn)印跡和Northern雜交技術(shù)進(jìn)一步驗證了部分差異cDNA片段的差異性。39個片段中有28個經(jīng)點(diǎn)雜交證實(shí)和箍示譜上的原始情形一致，18個片段中有11個經(jīng)Northern雜交證實(shí)為陽

2、性片羧。弱j璉：我翅夔差示囂忝勢輯熬瓣援攀已達(dá)60％浚上。最后，根據(jù)35#克隆的原始序列我們設(shè)計了三條特異引物。以誘導(dǎo)細(xì)胞的RNA禽成的cDNA雙鏈與假銜羧予的連接產(chǎn)物作為模板，制用RACE技術(shù)分鬟對35#堯隆靜3’秘5’旁籍序列避簿了擴(kuò)蠖。雋提裹黢cE靛特異瞧，我們?nèi)靻舞s特異雩l鏹PCR和攙稍阮R兩秘方法結(jié)合起來，成功絕擴(kuò)增了35#克隆的5’和3’的旁側(cè)序列，其長度分別為874bp和1063bp。該轉(zhuǎn)錄本總長為1887bp，和35#黨