麥胚凝集素化修飾昔萘酸沙美特羅納米粒-微粒干粉末吸入給藥系統(tǒng)的研究.pdf

1、本文旨在構建一種基于凝集素化納米粒載體的干粉吸入肺部時辰給藥系統(tǒng)，將可能為哮喘的時辰藥物防治新方案提供技術基礎。以昔萘酸沙美特羅(SalX)為模型藥物，殼聚糖(CS)為載體材料，麥胚凝集素(WGA)為修飾材料，通過離子交聯法聯合噴霧干燥工藝制得WGA化修飾的SalX納米粒-微粒(WGA-SalX-NiMS)系統(tǒng)。
　　 第一章采用離子交聯法制備得到殼聚糖納米粒(CS-NPs)，在戊二醛活化的條件下，用WGA對CS-NPs進行修飾

2、，并分別考察了戊二醛用量和WGA用量對二者結合率的影響。以BSM作為凝集素的特異性結合底物，WGA-CS-NPs同BSM的結合率高于未修飾的普通CS-NPs，說明WGA的凝集素結合活性。WGA同BSM的結合作用可以被NAG競爭抑制，反映出WGA-CS-NPs上錨合的凝集素活性保持及其對NAG結合的專一性。
　　 第二章成功建立了SalX體外分析方法，該方法線性范圍較廣，精密度和回收率均符合測定要求。通過噴霧干燥工藝成功制得三種N

3、iMS粉末(空白NiMS;SalX-NiMS;WGA-SalX-NiMS)，粉末得率均在65％以上。對NiMS粉末的粉體性質進行考察，結果表明，NiMS粉末外觀較為圓整規(guī)則，粒徑分布多集中在2～8μm范圍內，包封率在70％以上，載藥量為8％。體外釋放結果表明，經WGA化修飾后藥物釋放明顯減慢(P＜0.05)，證明WGA化修飾對納米粒載體降解的抑制效應;在釋放介質中加入NAG后，WGA-SalX-NiMS粉末體外釋藥速度明顯加快(P＜0.

4、05)，并且隨著NAG濃度的增加而進一步加快，而即使是最大濃度的NAG，其對SalX-NiMS體外釋藥速度仍無顯著影響，表明了NAG對凝集素WAG修飾微粒釋藥的促進作用。本實驗制備得到的兩種處方粉末(SalX-NiMS;WGA-SalX-NiMS)二級沉積百分比均在20％左右，可呼吸比例較高。
　　 第三章用MTT法考察細胞毒性，結果表明隨著納米粒溶液濃度的增加，A549細胞存活率降低。分別用熒光倒置顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡觀察

5、細胞攝取過程，結果表明隨著時間的延長，納米粒被A549細胞攝取的越來越多，納米粒經A549細胞攝取后主要分布在胞漿，WGA修飾可能有助于A549細胞對納米粒的攝取。
　　 第四章進行了WGA-SalX-SalX干粉吸入藥效學試驗，結果表明小鼠氣道連續(xù)噴入粉末27天，與模型組相比白細胞總數、嗜酸性粒細胞、淋巴細胞及巨噬細胞有下降的趨勢，但無統(tǒng)計學差異。SalX-NiMS組和WGA-SalX-NiMS組小鼠BALF中白細胞總數、嗜酸

6、性粒細胞、淋巴細胞及巨噬細胞均無顯著性差異。
　　 第五章成功建立了SalX在小鼠體內的含量測定分析方法，該法線性范圍較廣，專一性、精密度、準確度、提取回收率以及樣品處理后放置穩(wěn)定性均符合測定要求。小鼠血漿和肺組織藥物濃度測定結果表明WGA-SalX-NiMS粉末血藥濃度均普遍高于SalX-NiMS(P＜0.05)，這表明WGA修飾后的SalX-NiMS在小鼠體內易于釋藥，血漿和肺組織中藥物濃度較高，有利于哮喘發(fā)作時炎癥的控制與