硫酸類肝素-3-0-磺基轉(zhuǎn)移酶B1(HS3ST3B1)對乙型肝炎病毒(HBV)復制的下調(diào)作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:在HBV的生命周期中,HBV的復制是受到宿主和自身各種因素控制的。本課題旨在研究宿主因子HS3ST381對HBV復制的影響,并探討可能的作用機制。
   方法:將HS3ST381與HBV表達質(zhì)粒pCH9-HBV共轉(zhuǎn)染HepG2細胞,利用Southern blot和實時聚合酶鏈式反應(Real-time PCR)技術(shù)檢測過表達HS3ST381后HBV復制水平和總RNA水平的變化;同時,干擾過表達HS3ST381后,檢測HBV

2、復制水平和總RNA水平的變化;干擾內(nèi)源性HS3ST3BI后,檢測HBV復制水平的變化。在HBV穩(wěn)定細胞株HepG2. H7中轉(zhuǎn)染不同量HS3ST381,檢測HBV復制水平的變化;利用雙熒光素酶報告系統(tǒng)檢測過表達HS3ST381后HBV啟動子活性的改變,及干擾過表達的HS3ST381后HBV啟動子活性的改變。
   結(jié)果:Southern blot顯示:在HBV瞬時表達模型中,過表達HS3ST381后,HBV DNA水平有明顯下降

3、。RNAi干擾過表達HS3ST381后,HBV DNA水平則有所恢復;干擾內(nèi)源性HS3ST381,HBV DNA水平有一定程度上升;在HBV穩(wěn)定表達模型H7中,不僅進一步證實HS3ST381對HBV復制的下調(diào)作用,而且HBV DNA水平隨著HS3ST381轉(zhuǎn)染量增加而下降,呈現(xiàn)出HS3ST381的濃度依賴性。Real-time PCR顯示:過表達HS3ST381后,HBV總RNA水平有明顯下調(diào),而干擾過表達HS3ST381后,HBV總R

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