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文檔簡介
1、目的:基于α-鵝膏毒肽(α-amanitin)的作用機(jī)制和乙肝病毒復(fù)制轉(zhuǎn)錄特點(diǎn),初步探討α-鵝膏毒肽對HepG2.2.15細(xì)胞的毒性及其對乙型肝炎病毒(HBV)復(fù)制的影響。 方法:采用MTT法檢測不同濃度α-鵝膏毒肽對體外培養(yǎng)的HepG2 2.2.15細(xì)胞株的毒性,然后在無毒濃度下用不同濃度Q-鵝膏毒肽或拉米夫定與HepG2 2.2.15細(xì)胞共培養(yǎng)6天,分別在第3天和第6天收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液,采用時(shí)間分辨免疫熒光法(TRFIA)
2、測定上清HBsAg、HBeAg濃度;收獲細(xì)胞提取總RNA,行逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測細(xì)胞內(nèi)HasAg和HBcAg mRNA的表達(dá)。 結(jié)論:在本實(shí)驗(yàn)條件下α-鵝膏毒肽在0.006μg/ml~0.8μg/ml濃度時(shí)對HepG2 2.2.15細(xì)胞的毒性較小,低毒濃度下α-鵝膏毒肽可抑制HepG2 2.2.15細(xì)胞HBeAg、HBsAg的分泌及HBsAg和HBcAg mRNA的表達(dá)。隨濃度的增加,抑制作用越明顯,說明α-鵝
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