恩度與多西紫杉醇不同順序用藥的抗腫瘤效應(yīng)觀察.pdf

1、目的：觀察以不同給藥順序聯(lián)合使用恩度與多西紫杉醇的抗腫瘤和血管生成效應(yīng)、以及血管生成相關(guān)生物標(biāo)志物的變化，初步探討兩種給藥順序的作用機制，為臨床用藥提供參考。
　　 方法：建立肺腺癌A549荷瘤裸鼠模型，隨機分為4組：同時用藥組(恩度400μg·只-1·天-1、d1-d35，多西紫杉醇10mg·kg-1·3天-1、d1-d19)、先恩度組(恩度400μ g·只-1·天-1、d1-d35，多西紫杉醇10mg·kg-1·3天-1、d

2、16-d34)、模型組和空白對照組。實驗過程中測量移植瘤體積、裸鼠體重，實驗結(jié)束后，采用流式細(xì)胞術(shù)法檢測裸鼠血中活化循環(huán)血管內(nèi)皮細(xì)胞(aCECs)數(shù)，免疫組化方法檢測MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2、EMMPRIN、α-SMA表達(dá)，以CD34標(biāo)記血管內(nèi)皮。使用專業(yè)數(shù)碼相機采集圖像，image pro plus6.0圖像分析軟件中的宏(Pathology6)對圖片批量處理，得出每張圖片的積分光密度值(integrated

3、 opticaldensity，IOD)、取其平均值作為該切片的IOD值以反應(yīng)蛋白表達(dá)量，對上述指標(biāo)進(jìn)行定量計算及統(tǒng)計學(xué)分析。
　　 結(jié)果：⑴動物實驗結(jié)果：同時用藥組(39.94mm3)與先恩度組(99.57mm3)的移植瘤體積增長值均小于模型組(P=0.003，P=0.015)、同時用藥組對腫瘤生長的抑制較先恩度組更明顯；同時用藥組裸鼠體重與空白對照組接近，先恩度組裸鼠體重與模型組接近，均低于空白對照組(P=0.061，P=0

4、.073)。⑵流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果：兩用藥組的aCECs均較對照組高、且先恩度組高于同時用藥組(P<0.001)。⑶免疫組化染色結(jié)果：與模型組相比，兩用藥組MMP-2、MMP-9表達(dá)較低(P<0.05)，先恩度組的TIMP-1(P=0.048)、同時用藥組的TIMP-2表達(dá)上調(diào)(P=0.002)，同時用藥組EMMPRIN表達(dá)下調(diào)(P=0.021)。兩用藥組α-SMA表達(dá)均高于模型組(P=0.009，P=0.014)。⑷MVD結(jié)果比較：兩用藥組

5、的MVD均低于模型組(P=0.022，P=0.036)，兩用藥組間比較無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。⑸相關(guān)性分析：MMP-2與腫瘤體積呈正相關(guān)關(guān)系(P=0.020)，TIMP-2與腫瘤體積呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(P=0.027)。MMP-2與aCECs呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(P=-0.025)，TIMP-1與aCECs呈正相關(guān)關(guān)系(P=0.041)，α-SMA與aCECs呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(P=0.044)。MMP-2與MVD呈正相關(guān)關(guān)系(P=0.031)，α-SMA與MV

6、D呈正相關(guān)關(guān)系(P=0.002)。MMP-2與MMP-9呈正相關(guān)關(guān)系(P=0.008)，EMMPRIN與MMP-9呈正相關(guān)關(guān)系(P=0.001)。
　　 結(jié)論：兩藥均可能通過各自作用點下調(diào)MMPs、并可能發(fā)揮“血管正?；弊饔?，但同時用藥組的抑瘤效果及裸鼠生存質(zhì)量均好于先恩度組。聯(lián)合用藥可抑制腫瘤引起的間質(zhì)反應(yīng)、在一定程度上限制腫瘤生長。aCECs可能表現(xiàn)為先上升后下降的過程，早期升高可能提示新生血管床面積減小、繼而下降反映聯(lián)合