電針治療緩解CCI模型大鼠的疼痛和抑郁并抑制ACC腦區(qū)中ERK1-2的活化.pdf

1、目的：
　　電針通過給予脈沖電流刺激穴位，是一種有效的止痛治療方式。許多脊髓上結構，包括前扣帶回皮層(ACC)，參與電針抑制神經病理性疼痛的作用機制。ACC腦區(qū)中的細胞外調節(jié)蛋白激酶1/2(ERK1/2)在調節(jié)慢性神經病理性疼痛的情感反應中起重要作用。在本研究中，研究電針刺激大鼠的“足三里”、“陽陵泉”對慢性縮窄性損傷(CCI)誘導的痛覺過敏和抑郁行為的影響，同時探索電針引起CCI模型大鼠ACC腦區(qū)中ERK1/2的活化水平的變化情

2、況。
　　方法：
　　1、觀察電針對CCI大鼠的痛覺過敏的影響。將SD大鼠隨機分為四組:對照組+假電針組（Control+shamEA）、對照組+電針組(Control+EA)、CCI造模組+假電針組（CCI+shamEA）、CCI造模組+電針組（CCI+EA）。每組分別于術后第1天至14天同側給予電針刺激治療。分別于術前、術后第1、3、5、7、10、14、21、28和35天測量熱縮足反射潛伏期(PWL)和機械縮足反射閾值(

3、PWT)。
　　2、觀察電針對CCI大鼠的抑郁行為的影響。將SD大鼠隨機分為四組:Control+shamEA、Control+EA、CCI+shamEA、CCI+EA。每組分別于術后第1天至14天同側給予電針刺激治療。分別于術前、術后第7、14、21、28和35天用FST來測量懸浮時間。
　　3、觀察電針對CCI大鼠ACC腦區(qū)中ERK1/2活化水平的影響。將SD大鼠隨機分為四組:Control+shamEA、Control

4、+EA、CCI+shamEA、CCI+EA。每組分別于術后第1天至14天同側給予電針刺激治療。用蛋白電泳和免疫組化分別于術后28天、35天檢測ACC腦區(qū)中ERK1/2活化水平的變化。
　　4、觀察ACC內注射U0126對CCI大鼠痛覺過敏和抑郁行為的影響和ACC腦區(qū)中ERK1/2活化水平的影響。CCI造模，分別從術后第21天至27天或術后第28天至34天注入U0126或DMSO。分別檢測術后第28天、35天的PWL和PWT、FST

5、的懸浮時間。用蛋白電泳分別于術后第28天、35天檢測ACC腦區(qū)中ERK1/2活化水平的變化。
　　5、觀察CCI大鼠中ERK1/2活化的亞細胞定位。CCI造模術后7天取材，免疫熒光雙重染色方法檢測p-ERK1/2在星形膠質細胞(GFAP)、小膠質細胞(Iba1)和神經元(NeuN)中的表達情況。
　　結果：
　　1、早期規(guī)律和持續(xù)的電針治療（術后第1天至第14天），可減輕CCI誘導的熱和機械性痛覺過敏，和CCI+sha

6、mEA組相比，在術后第5天有統(tǒng)計學差異(p＜0.05)，作用均持續(xù)超過術后35天。
　　2、強迫游泳實驗結果顯示，CCI引起大鼠術后28天和35天懸浮時間增加(p＜0.001)，早期規(guī)律和持續(xù)的電針治療（術后第1天至第14天）可逆轉CCI誘導的大鼠懸浮時間的增加(p＜0.01)。
　　3、蛋白印跡和免疫組化的結果均顯示，在CCI術后28天和35天，ACC腦區(qū)中p-ERK1/2的表達上調，與Control+shamEA相比(p

7、＜0.001);早期規(guī)律電針治療，可抑制CCI引起的ACC腦區(qū)中ERK1/2的活化(p＜0.05)。
　　4、蛋白印跡顯示，CCI術后第21天至第27天持續(xù)向ACC中注射U0126，可抑制CCI引起的術后28天和35天ACC中p-ERK1/2表達的增加(p＜0.001)。對CCI引起的熱和機械痛覺過敏沒有影響。但可顯著逆轉CCI誘導的術后第28天和第35天大鼠的懸浮時間的增加(P＜0.01)。
　　5、免疫熒光雙重染色顯示在