乏氧和光照雙控的新型診斷治療前藥的構(gòu)建與體外抗腫瘤活性評(píng)價(jià).pdf

1、診斷治療試劑集疾病診斷和藥物治療于一體，具備藥物釋放控制及藥物釋放在線檢測(cè)的功能，同時(shí)實(shí)時(shí)報(bào)告疾病治療效果，從而實(shí)現(xiàn)診斷和治療的同步，因此，診斷治療試劑引起了人們的關(guān)注?；钚运幬锏目煽蒯尫胖饕ㄟ^內(nèi)部刺激（例如，乏氧，低 pH等）或外部刺激（例如，光照，磁場(chǎng)等）兩種手段來實(shí)現(xiàn)。乏氧作為實(shí)體瘤最重要的特征已被用于藥物控釋及腫瘤的診斷研究，但某些疾病同樣會(huì)引起組織乏氧，導(dǎo)致藥物在非腫瘤部位釋放從而引起毒副作用。光具有可操控性強(qiáng)的特點(diǎn)，可在特

2、定的時(shí)間和位點(diǎn)上實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物釋放的控制。然而，光激活性前藥所釋放的藥物同樣會(huì)對(duì)所輻照區(qū)域的正常組織產(chǎn)生毒副作用，尤其是太陽光輻照所導(dǎo)致的藥物釋放還會(huì)引起外部皮膚中毒。若將腫瘤的乏氧特征（腫瘤組織微環(huán)境）和光（外部刺激）的可控性優(yōu)勢(shì)有機(jī)地結(jié)合，實(shí)施乏氧和光照雙控策略，設(shè)計(jì)新型診斷治療前藥，則可提高藥物釋放的精確性，降低抗腫瘤藥物的毒副作用，并實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)藥物釋放以及藥物的治療效果，達(dá)到精確的個(gè)體化治療目的。
　　本文以吉西他濱（GMC）為

3、模型，E-鄰羥基肉桂酸（CAE）作為光控基團(tuán)，4-硝基芐醚作為乏氧響應(yīng)基團(tuán)，利用系列共價(jià)偶聯(lián)反應(yīng)合成了乏氧和光雙重控制GMC釋放的診療前藥GMC-CAE-NO2。采用NMR、MS及IR方法對(duì)前藥及中間體的結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征；采用HPLC及MS法探討藥物釋放的機(jī)制；采用熒光光譜法探討乏氧孵育時(shí)間及光照時(shí)間對(duì)藥物釋放量的影響；以 GM C和7-二乙氨基香豆素（CM）為參比，采用 MTT法探討在不同條件下GMC-CAE-NO2對(duì)MCF-7細(xì)胞活力的

4、影響；采用共聚焦熒光成像法對(duì)細(xì)胞乏氧水平及細(xì)胞內(nèi)藥物釋放情況進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明：前藥GM C-CA E-N O2具有乏氧選擇性；經(jīng)乏氧孵育和紫外光照射，釋放出GM C的同時(shí)生成CM；CM的熒光強(qiáng)度可以反映GM C的釋放量；藥物釋放量隨乏氧孵育及光照時(shí)間的延長(zhǎng)而增加；前藥只有在乏氧結(jié)合光照條件下才對(duì)MCF-7細(xì)胞產(chǎn)生毒性，且具有劑量依賴性；釋放出的CM用于報(bào)告細(xì)胞乏氧程度及胞內(nèi)藥物釋放情況。所構(gòu)建的前藥GM C-C AE-N O2具有診斷