鵝絨藤單體化合物體外抗腫瘤活性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究從鵝絨藤提取分離得到的三種單體化合物對體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞株增殖的抑制作用及其可能的作用機(jī)制。
　　方法：用CellCountingKit-8法(CCK-8)觀察,以正常人胃粘膜上皮細(xì)胞GES-1作為正常對照,用不同濃度的鵝絨藤提取分離得到的正三十八烷(MonomerCompounds-Ⅱ,MC-Ⅱ),山奈酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(MonomerCompounds-Ⅴ,MC-Ⅴ),7-O-α-L-鼠李吡喃糖基-山奈酚-

2、3-O-α-L-鼠李糖苷(MonomerCompounds-Ⅵ,MC-Ⅵ)等單體化和物分別作用于人宮頸癌細(xì)胞Hela、小鼠淋巴瘤細(xì)胞YAC-1和人胃癌細(xì)胞MGC-803等細(xì)胞株24、48、72、96h后,觀察對這三種腫瘤細(xì)胞增殖活性的影響,并選取對三種單體化合物敏感的細(xì)胞株,采用Hoechst33342/PI雙染熒光染色方法,觀察不同濃度單體化合物作用下細(xì)胞凋亡的形態(tài)變化。
　　結(jié)果：①M(fèi)C-Ⅱ作用Hela細(xì)胞48和72h時(shí),各劑

3、量組的OD值有差異,在24、48、72h時(shí)對YAC-1細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用,在96h時(shí)有抑制作用(P<0.05);MC-Ⅴ和MC-Ⅵ在50、100和200μg·mL-1濃度下處理Hela和YAC-1細(xì)胞48、72和96h后,其OD值均低于對照組(P<0.05),且濃度越高OD值越低。MC-Ⅴ在各濃度下處理MGC-803細(xì)胞24、48、72和96h后,其OD值均明顯低于對照組(p<0.05),MC-Ⅵ各濃度僅在24h對MGC-803細(xì)胞有抑

4、制作用(P<0.05)。②MC-Ⅴ在作用Hela、YAC-1和MGC-803等細(xì)胞48h后,Hoechst33342/PI染色,熒光顯微鏡下,可觀察到腫瘤細(xì)胞在加入不同濃度的單體化合物后,細(xì)胞開始萎縮,核開始固縮,隨著濃度的提高,染色質(zhì)凝集成團(tuán)塊狀,顯示出不斷增強(qiáng)的亮藍(lán)色和紅光,其中以胃癌MGC-803表現(xiàn)最為明顯;72h后的腫瘤細(xì)胞核固縮進(jìn)一步加強(qiáng),形成明顯的圓珠子狀結(jié)構(gòu),細(xì)胞邊集化嚴(yán)重,呈現(xiàn)不均一的熒光顯色結(jié)構(gòu)。③MC-Ⅵ在作用YA

5、C-1細(xì)胞48h后,各實(shí)驗(yàn)濃度組顯示出不斷增強(qiáng)的強(qiáng)藍(lán)光和紅光,跟單體化合物濃度成正相關(guān),細(xì)胞核多凝聚,固縮的染色質(zhì)發(fā)出極強(qiáng)的亮藍(lán)光;72h后,隨著單體藥物誘導(dǎo)時(shí)間的延長,細(xì)胞壁破壞嚴(yán)重,裂解細(xì)胞增多,細(xì)胞核被PI復(fù)染成顆粒狀深淺不均的強(qiáng)橘紅色熒光,典型晚期細(xì)胞凋亡形態(tài)結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)論：①體外實(shí)驗(yàn)表明,鵝絨藤提取分離得到的單體化合物對正常人胃粘膜GES-1生長抑制不明顯,對腫瘤細(xì)胞具有明顯的生長抑制作用,且對腫瘤細(xì)胞具有明顯的選擇性