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文檔簡介
1、水稻是世界主要的糧食作物。旱稻,也稱陸稻,是相對于水稻而言的一種稻谷,是一種抗旱力強、耐貧瘠、適于旱地直播旱管的栽培稻類型。本課題以早稻成熟種子為外植體,擬利用掌葉半夏凝集素(Pinellia pedatisecta agglutinin,PPA)基因轉(zhuǎn)化,建立較成熟的早稻栽培品種抗蚜蟲基因的轉(zhuǎn)化體系。
本文選用了“鯤旱1號”,從種子表面消毒時間、不同培養(yǎng)基成分、不同激素濃度對愈傷誘導的影響,到侵染、篩選等各方面進行了研究
2、,將抗蟲基因(PPA基因)和bar抗性基因通過農(nóng)桿菌介導法導入早稻愈傷組織,在含除草劑的選擇培養(yǎng)基上進行篩選,然后分化并壯苗,獲得了抗性植株。
實驗結(jié)果表明,最適的消毒劑是次氯酸鈉,NB培養(yǎng)基中添加2 mg·L-1的2,4-D是愈傷誘導的最佳培養(yǎng)基。轉(zhuǎn)化前5天進行愈傷組織繼代培養(yǎng)有利于提高轉(zhuǎn)化率,當農(nóng)桿菌濃度在0.2-0.3之間時,轉(zhuǎn)化效果最好。將已轉(zhuǎn)化的愈傷組織在含2 mg·L-1的2,4-D的恢復培養(yǎng)基上恢復培養(yǎng)5天至
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