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文檔簡介
1、近年來,植物基因工程發(fā)展迅速,已經(jīng)在大豆、玉米、棉花等作物中被廣泛應(yīng)用。早稻在糧食作物中占舉足輕重的地位,與水稻相比具有許多優(yōu)勢。本課題主要解決早稻種植時(shí)田間雜草的問題,培育抗除草劑早稻新品種,從而可以大面積種植早稻,并噴灑除草劑以除掉田間雜草。本試驗(yàn)要將抗草丁膦bar基因轉(zhuǎn)入早稻細(xì)胞中,建立成熟完善的旱稻轉(zhuǎn)化體系。
本課題選用“鯤旱一號(hào)”這個(gè)早稻品種,分別用基因槍法和農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將bar基因轉(zhuǎn)入早稻細(xì)胞,研究了基因槍轉(zhuǎn)化
2、時(shí)各轟擊參數(shù)以及農(nóng)桿菌侵染時(shí)各因素對轉(zhuǎn)化的影響,以basta為篩選劑對轉(zhuǎn)化后愈傷組織進(jìn)行篩選,篩選得到的抗性愈傷組織經(jīng)預(yù)分化、分化,最終出苗,獲得轉(zhuǎn)基因植株。
試驗(yàn)結(jié)果表明,在NB培養(yǎng)基上誘導(dǎo)的愈傷組織狀態(tài)比在MS培養(yǎng)基上的好,誘導(dǎo)一個(gè)月后繼代一次再轉(zhuǎn)化效果最好。在用基因槍轟擊時(shí),對愈傷組織進(jìn)行高滲處理有利于轉(zhuǎn)化,金粉和質(zhì)粒用量分別為200μg/槍和1μg/槍時(shí)最宜,轟擊壓力和轟擊距離分別為1100 psi和6 cm時(shí)最佳
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