紅褐斑腿蝗卵黃蛋白研究.pdf

1、卵黃蛋白(vitellin，簡(jiǎn)稱(chēng)Vt)是昆蟲(chóng)及其它節(jié)肢動(dòng)物卵內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)儲(chǔ)備，能為正在發(fā)育的胚胎提供氨基酸、脂肪、碳水化合物、維生素、硫、磷等營(yíng)養(yǎng)和功能性物質(zhì)，它的前體是來(lái)源于脂肪體的雌性特異性蛋白——卵黃原蛋白(vitellogenin，簡(jiǎn)稱(chēng) Vg)。本文以紅褐斑腿蝗Catantops pinguis(St?l)為研究對(duì)象，對(duì)其卵黃蛋白進(jìn)行研究，研究結(jié)果如下：
　　1．紅褐斑腿蝗卵黃蛋白分離純化及主要理化性質(zhì)分析。
　　用蒸餾

2、水沉淀法、凝膠過(guò)濾、蛋白質(zhì)電泳等方法提取純化了紅褐斑腿蝗卵黃蛋白，并對(duì)其性質(zhì)進(jìn)行了研究。電泳結(jié)合不同染色方法證明紅褐斑腿蝗的卵黃蛋白為一種雌性特異性糖脂復(fù)合蛋白，其分子量為548 kDa，由7個(gè)亞基組成，亞基分子量分別為147.3 kDa、100.2 kDa、95.9 kDa、59.6 kDa、53.6 kDa、49.0 kDa和42.2 kDa，亞基之間沒(méi)有二硫鍵聯(lián)接。經(jīng)高效液相色譜分析，紅褐斑腿蝗卵黃蛋白檢測(cè)到17種最常見(jiàn)的氨基酸及

3、NH3峰，其中谷氨酸（Glu）百分含量最高，達(dá)13.46％，天冬氨酸（Asp）、亮氨酸（Leu）、半胱氨酸（Cys）、精氨酸（Arg）含量比較高，脯氨酸（Pro）、組氨酸（His）、賴(lài)氨酸（Lys）含量較低。
　　2．用ELISA直接法測(cè)定繁殖期間紅褐斑腿蝗卵黃發(fā)生動(dòng)態(tài)。
　　用純化后卵黃蛋白制得卵黃蛋白特異性抗血清和卵黃蛋白酶標(biāo)抗體，建立 ELISA直接法測(cè)定繁殖期間紅褐斑腿蝗卵黃發(fā)生動(dòng)態(tài)。結(jié)果表明：脂肪體和血淋巴中卵黃原

4、蛋白含量變化相似，呈先上升后下降再上升趨勢(shì)，但存在時(shí)間上的滯后性，5月1日、5月9日兩者的卵黃原蛋白含量較高，4月23日、5月16日含量較低。卵巢中卵黃蛋白含量的變化與前兩者相差比較大，呈先下降后上升趨勢(shì)，卵黃蛋白在4月13日、5月16日較高，5月1日、5月9日最低。
　　3．卵巢發(fā)育不同時(shí)期紅褐斑腿蝗卵黃蛋白與可溶性蛋白含量變化。
　　紅褐斑腿蝗交配季節(jié)每隔7天取交配后成蟲(chóng)10對(duì)左右，觀察卵巢形態(tài)，測(cè)定卵巢鮮重，按照陳偉等

5、2005方法稍加改進(jìn)，對(duì)卵巢進(jìn)行分級(jí)：卵巢共分為5級(jí)。I級(jí)，透明期；Ⅱ級(jí)，卵黃沉淀期；Ⅲ級(jí)，卵粒形成期；Ⅳ級(jí)，成熟待產(chǎn)期；V級(jí)，產(chǎn)卵期。實(shí)驗(yàn)測(cè)得在卵巢發(fā)育不同時(shí)期卵巢重、卵黃蛋白含量差異顯著，5月16日卵巢最重、卵黃蛋白含量最高，卵黃含量與卵巢重呈線性正相關(guān)。繁殖期間紅褐斑腿蝗可溶性蛋白含量差異不顯著，但有波動(dòng)，5月16日可溶性蛋白含量最高，與卵黃蛋白含量呈線性正相關(guān)。
　　4．繁殖期間紅褐斑腿蝗體液免疫活性的變化。
　　紅