中華鋸齒米蝦性腺早期分化及卵黃蛋白發(fā)生免疫定位.pdf

1、中華鋸齒米蝦（Neocaridina denticulata sinensis）屬于甲殼綱（Crustacea），十足目（Decapoda），匙指蝦科（Atyidae），新米蝦屬（Neocaridina）。中華鋸齒米蝦為小型經(jīng)濟(jì)蝦類，具有廣溫、廣鹽性、繁殖力快、生命力強(qiáng)、生長(zhǎng)周期短等特點(diǎn)，是生態(tài)、生理和毒理等實(shí)驗(yàn)的良好材料。
　　 本文采用光鏡和透射電鏡技術(shù)觀察了中華鋸齒米蝦的性腺早期發(fā)育和分化過程，采用免疫組織化學(xué)技術(shù)研究了其

2、性腺發(fā)育過程中卵黃蛋白發(fā)生和積累特征。不僅為中華鋸齒米蝦生殖生物學(xué)和環(huán)境生物學(xué)的研究提供基礎(chǔ)資料，而且對(duì)甲殼動(dòng)物的生殖發(fā)育調(diào)控以及遺傳育種具有重要的理論和實(shí)際意義。
　　 中華鋸齒米蝦原始性腺發(fā)生與發(fā)育：
　　 仔蝦孵化第3 天到第6 天為原始生殖細(xì)胞遷移和性腺原基形成時(shí)期。首先，原始生殖細(xì)胞從發(fā)源地沿著消化道和背部動(dòng)脈遷移。然后，原始生殖細(xì)胞和早期間質(zhì)細(xì)胞聚集在背動(dòng)脈兩側(cè)靠近中腸腸道上方處，共同組成生殖嵴。隨后原始生殖

3、細(xì)胞不斷增殖，細(xì)胞體積明顯增大，性腺原基在腸道上方兩側(cè)分化出左右對(duì)稱區(qū)域，并出現(xiàn)被膜包圍，被膜的出現(xiàn)標(biāo)志著性腺原基已經(jīng)基本形成。從原始生殖細(xì)胞遷移到性腺原基形成，按照細(xì)胞形態(tài)不同可將原始生殖細(xì)胞劃分為三個(gè)時(shí)期：Ⅰ期原始生殖細(xì)胞、Ⅱ期原始生殖細(xì)胞、Ⅲ期原始生殖細(xì)胞。
　　 中華鋸齒米蝦卵巢分化與發(fā)育：
　　 孵化第10 天幼體，卵巢腔形成，卵巢腔中同時(shí)存在四種細(xì)胞：Ⅲ期原始生殖細(xì)胞、原始生殖細(xì)胞向卵原細(xì)胞過渡的細(xì)胞、早期卵

4、原細(xì)胞以及一些早期間質(zhì)細(xì)胞分布在卵原細(xì)胞周圍。
　　 孵化第13 天幼體，原始生殖細(xì)胞消失，卵原細(xì)胞體積明顯增大，細(xì)胞核核仁明顯，核質(zhì)比較小。細(xì)胞質(zhì)中細(xì)胞器數(shù)目大量增多，存在線粒體、溶酶體、核糖體、高爾基體。
　　 中華鋸齒米蝦精巢分化與發(fā)育：
　　 孵化第23 天幼體，精巢開始出現(xiàn)分化，間質(zhì)細(xì)胞環(huán)繞排列成囊狀，形成早期的精巢，這個(gè)時(shí)期的精巢還無完整的膜包被，主要存在兩個(gè)時(shí)期的細(xì)胞：Ⅲ期原始生殖細(xì)胞和原始生殖細(xì)胞

5、向精原細(xì)胞過渡時(shí)期的細(xì)胞。孵化第35 天幼體，此時(shí)精巢中原始生殖細(xì)胞消失，出現(xiàn)精原細(xì)胞且數(shù)目逐漸增多，在精原細(xì)胞周圍還有支持細(xì)胞包圍。
　　 通過免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)表明：中華鋸齒米蝦幼體孵化70 天后卵巢中出現(xiàn)卵黃發(fā)生早期卵母細(xì)胞（OC2），細(xì)胞質(zhì)中開始出現(xiàn)卵黃蛋白顆粒，卵黃蛋白顆粒均勻的分布在細(xì)胞質(zhì)中。幼體孵化第82 天卵巢中出現(xiàn)卵黃發(fā)生中期卵母細(xì)胞（OC3），此時(shí)細(xì)胞體積明顯增大，細(xì)胞質(zhì)邊緣出現(xiàn)大量的卵黃蛋白球，表明此時(shí)為卵黃