硫化氫易化血管鈣化大鼠頸動脈竇壓力感受性反射.pdf

1、目的：血管鈣化（VC）是指鈣鹽在血管壁的異位沉積，是包括高血壓在內的多種血管病變的共同病理基礎和心血管事件的獨立危險因素。鈣化血管壓力感受性反射敏感性顯著降低。H2S具有改善血管鈣化的作用，并且能夠增加正常大鼠或高血壓大鼠壓力感受性反射敏感性。因此，本研究旨在證實H2S具有易化血管鈣化大鼠壓力性反射敏感性的作用。
　　方法：⑴180-200g的雄性 SD大鼠隨機分為4組（n=6）：對照組（Control， Con）, NaHS（5

2、6μmol/L,腹腔注射）組,血管鈣化組（Cal）, Cal+NaHS（56μmol/L，腹腔注射）組。應用維生素D3（300000 IU/kg，肌注）和尼古丁（25 mg/kg，灌胃）制備大鼠血管鈣化模型。Con組和NaHS組分別用相同劑量的溶劑肌注和灌胃。相同的條件飼養(yǎng)4周后，運用本實驗室自行設計的實驗程序，隔離灌流各組大鼠的頸動脈竇區(qū)，同時記錄動脈血壓，繪制壓力感受性反射功能曲線（ functional curve of caro

3、tid baroreceptor, FCCB），記錄各功能參數(shù)。ELISA法檢測血漿堿性磷酸酶（ Alkaline Phosphatase，ALP）活性；蘇木精-伊紅（Hematoxylin-eosin, H-E）染色觀察鈣化主動脈和頸總動脈的病理學改變；化學法檢測血漿 H2S的含量；蛋白印跡法（Western blot）檢測胸主動脈和頸動脈血管平滑肌收縮表型蛋白（Calponin和SM22α）、成骨樣細胞表型蛋白（BMP2和RUNX2

4、）以及內質網(wǎng)應激（ endoplasmic reticulum stress， ERS）蛋白（ CHOP、GRP78和Caspase12）表達水平。⑵180-200g的雄性SD大鼠制備血管鈣化模型，運用本實驗室自行設計的實驗程序，急性隔離灌流各組大鼠的頸動脈竇區(qū)，記錄動脈血壓，繪制FCCB。應用不同濃度NaHS（25，50，100μmol/L）急性隔離灌流，觀察其對血管鈣化大鼠頸動脈竇壓力感受性反射(carotid sinus baro

5、reflex, CSB)的作用。
　　結果：①與Con組和NaHS組相比，Cal組大鼠動脈血壓顯著升高，血漿 H2S含量顯著降低。Cal+NaHS組大鼠較Cal組大鼠動脈血壓顯著降低，H2S含量顯著升高。Cal組血漿ALP活性顯著高于Con組（170.0±5.98 U/L vs.37.4±3.87 U/L，P＜0.05），而Cal+NaHS組血漿ALP活性顯著低于Cal組（52.0±6.51 U/L，P＜0.05）。H-E染色顯示

6、Cal組大鼠胸主動脈和頸總動脈中膜彈性板增厚、卷曲、斷裂，結構紊亂。Cal+NaHS組中膜的彈性板的厚度和結構有一定程度的改善。與Con組相比，Cal組大鼠胸主動脈和頸動脈血管平滑肌收縮表型蛋白calponin和SM22α明顯下調，成骨樣細胞表型蛋白BMP2和RUNX2以及ERS蛋白CHOP、GRP78和 caspase12明顯上調（all P＜0.05）。與Cal組相比， Cal+NaHS組calponin和SM22α蛋白表達上調，

7、BMP2、RUNX2、CHOP、GRP78，Caspase12蛋白表達均明顯下調（all P＜0.05）。Cal組與Con組相比，F(xiàn)CCB向右上方移位，曲線斜率（peak slop, PS）由0.34±0.01降至0.24±0.01；血壓反射性下降幅度（reflex decrease, RD）由37.6±0.78 mmHg下降至29.1±0.92 mmHg；閾壓（threshold pressure, TP）由74.3±0.90 mmH

8、g增加至83.3±1.10 mmHg；平衡壓（equilibrium pressure, EP）由96.7±0.52 mmHg增加至115.0±1.39 mmHg；飽和壓（saturation pressure, SP）由195.5±2.82 mmHg增加至204.3±1.98 mmHg（all P＜0.05）。Cal+NaHS組與Cal組相比，F(xiàn)CCB向左下方移位，PS由0.24±0.01升至0.30±0.01；RD由29.1±0.9

9、2 mmHg升至32.0±0.77 mmHg；TP由83.3±1.10 mmHg降至78.6±1.37 mmHg；EP由115.0±1.39 mmHg降至99.6±1.17 mmHg；SP由204.3±1.98 mmHg降至201.4±0.55mmHg（all P<0.05）。②不同濃度NaHS急性灌流血管鈣化大鼠的頸動脈竇區(qū)，發(fā)現(xiàn)可劑量依賴性的易化血管鈣化大鼠CSB，使FCCB向左下方移位，PS由 Cal組的0.24±0.01分別升至

10、0.29±0.01（25μmol/L）、0.31±0.01（50μmol/L）、0.34±0.01（100μmol/L）（all P<0.05）；RD由29.1±0.92 mmHg分別增至33.2±0.54 mmHg、38.2±0.84 mmHg、42.6±0.73 mmHg（all P<0.05）；TP由83.3±1.10 mmHg分別降至77.1±1.34 mmHg、73.9±1.37 mmHg、69.4±1.17 mmHg（all

11、 P<0.05）；EP由115.0±1.39 mmHg分別降至113.3±1.17 mmHg、112.3±1.84 mmHg、111.5±0.90 mmHg（all P<0.05）；SP由204.3±1.98 mmHg分別降至201.2±1.37 mmHg、200.6±1.22 mmHg、197.4±1.52mmHg（all P<0.05）。
　　結論：H2S能夠顯著易化鈣化血管壓力感受性反射的敏感性。H2S可能成為調控鈣化血管壓