基因載體陽離子類脂設計合成及生物性能研究.pdf

1、本論文設計了2類基因載體陽離子類脂，合成、提純了計40個化合物，其中大部分為新化合物，全部產(chǎn)品經(jīng)過IR，1HNMR，13CNMR，HRMS或MS表征結(jié)構(gòu)正確，純度符合轉(zhuǎn)染要求。 所合成陽離子類脂可制成陽離子脂質(zhì)體(囊泡)，采用TEM，動態(tài)光散射，及zeta-電位儀等手段對其進行研究，初步得到陽離子類脂及由其所制備出的陽離子脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)與性能的關系。所制備的陽離子脂質(zhì)體可和DNA形成脂質(zhì)體/DNA復合物。采用瓊脂糖凝膠電泳的方法

2、對脂質(zhì)體/DNA復合物進行表征。 采用所制備的陽離子脂質(zhì)體作為基因運載工具，轉(zhuǎn)運質(zhì)粒DNApGL3-control對COS-7細胞株及Hep-2細胞株進行細胞轉(zhuǎn)染實驗，以2種商品化基因轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine2000及Sofast進行對照，篩選出6個轉(zhuǎn)染效率較高的陽離子脂質(zhì)體。采用所篩選出來的6個基因載體陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)運質(zhì)粒DNApGL3-control在另外3種哺乳動物細胞株B16，MCF-7，Hepa1-6中進行

3、細胞轉(zhuǎn)染校驗實驗；采用所篩選出來的6個基因載體陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)運質(zhì)粒DNApGFP-N2在5種細胞株COS-7，Hep-2，B16，MCF-7，Hepa1-6中進行細胞轉(zhuǎn)染校驗實驗，證實所篩選出的6個陽離子脂質(zhì)體基因載體的轉(zhuǎn)染效率高于或相當于2種商品化基因轉(zhuǎn)染試劑。采用MTT方法對所篩選出的6個陽離子脂質(zhì)體的細胞毒性進行了測量，證實所篩選出的6個陽離子脂質(zhì)體基因載體的細胞毒性很低，具有作為基因載體的應用前景。 對陽離子類脂結(jié)構(gòu)與