二甲雙胍對(duì)膀胱癌增殖的抑制作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：初步探討降糖藥物二甲雙胍對(duì)膀胱腫瘤細(xì)胞的抑制作用及其相關(guān)機(jī)制。
　　方法：1.采用Cell Counting Kit-8（CCK-8）試劑盒分析二甲雙胍對(duì)膀胱腫瘤細(xì)胞增殖的影響；2.應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)二甲雙胍對(duì)細(xì)胞周期的影響。3.通過(guò)免疫印跡方法檢測(cè)相關(guān)蛋白確定可能參與其中的信號(hào)分子；4.裸鼠右側(cè)腋窩皮下接種膀胱癌 T24細(xì)胞，以建立膀胱癌的裸鼠皮下移植瘤模型；藥物處理組將二甲雙胍以200mg/kg/day注射裸鼠腹腔內(nèi)，觀

2、察其對(duì)裸鼠食量、體重和膀胱癌皮下移植瘤的影響。5.應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)膀胱癌皮下移植瘤細(xì)胞內(nèi) Ki67、VEGF、CD31表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：1.在各時(shí)間點(diǎn)（24小時(shí)，48小時(shí)，72小時(shí)）二甲雙胍處理組與對(duì)照組相比膀胱腫瘤細(xì)胞的增殖受到明顯抑制（P<0.01或P<0.05)；2.與對(duì)照組比較，二甲雙胍處理組G0/G1期細(xì)胞比例上升，S期細(xì)胞比例下降（P<0.01或P<0.05)。3.免疫蛋白印跡發(fā)現(xiàn)，二甲雙胍處理組中的磷

3、酸化 AMP激活的蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）表達(dá)升高，同時(shí)細(xì)胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表達(dá)下降(P<0.01或P<0.05)。4.二甲雙胍顯著抑制膀胱癌皮下移植瘤的生長(zhǎng)并減輕瘤重，裸鼠體重和飲食情況并未受到影響；5.二甲雙胍處理組移植瘤內(nèi)Ki67、VEGF和CD31陽(yáng)性比例較對(duì)照組下降。
　　結(jié)論：1.體外實(shí)驗(yàn)中二甲雙胍能夠明顯抑制膀胱腫瘤細(xì)胞的增殖，通過(guò)下調(diào)cycl