大麻素1型受體在大鼠子宮內(nèi)膜異位病灶神經(jīng)生長中的作用.pdf

1、目的：在子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis，ENDO)模型大鼠，研究子宮內(nèi)膜異位囊腫組織中神經(jīng)生長的發(fā)展過程以及大麻素1型受體(Cannabinoid receptor1,CB1R)對異位囊腫神經(jīng)生長的影響；在培養(yǎng)的大鼠背根神經(jīng)節(jié)(Dorsal root ganglion，DRG)神經(jīng)元，研究大麻素1型受體對神經(jīng)突起外向生長的影響及其可能的分子機制。
　　方法：手術(shù)將大鼠的子宮組織碎片移植到自身的腸系膜動脈上建立大鼠子宮內(nèi)

2、膜異位癥(ENDO)模型，利用免疫熒光或免疫印跡方法檢測異位囊腫生長過程中泛神經(jīng)標(biāo)志物蛋白基因產(chǎn)物(Protein gene product，PGP)9.5和CB1R的表達變化；觀察CB1R激動劑或阻斷劑對大鼠子宮內(nèi)膜異位囊腫組織中神經(jīng)生長的影響。利用免疫熒光和藥理學(xué)方法，觀察CB1R激動劑對培養(yǎng)DRG神經(jīng)元突起外向生長的影響以及絲裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases，MAPKs)，包括細

3、胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶(Extracellular signal-regulated kinase，ERK)、p38、c-Jun N-末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)，抑制劑對CB1R激動劑誘導(dǎo)的神經(jīng)元突起外向生長的影響。
　　結(jié)果：免疫熒光結(jié)果顯示PGP9.5在異位囊腫組織的神經(jīng)纖維上表達，主要分布在囊腫門處。免疫印跡結(jié)果顯示隨著異位囊腫的生長，PGP9.5(2周：0.38±0.05；4周：0.6

4、3±0.03；8周：0.80±0.07，P＜0.01)和CB1R(2周：0.48±0.04；4周：0.68±0.01；8周：0.80±0.03，P＜0.01)的蛋白表達水平均逐漸增加。另外，免疫熒光結(jié)果顯示，與對照組（357±38 neurites/mm2）相比，鞘內(nèi)注射CB1R激動劑ACPA使囊腫組織中PGP9.5陽性表達的神經(jīng)纖維的數(shù)量明顯增加（511±39 neurites/mm2）；而CB1R阻斷劑AM251使囊腫組織中PGP9

5、.5陽性表達的神經(jīng)纖維的數(shù)量明顯下降（198±36 neurites/mm2）。免疫印跡結(jié)果顯示，與對照組(0.75±0.01)相比，ACPA使囊腫組織內(nèi)PGP9.5的蛋白水平增加(0.81±0.01，P＜0.05)，而AM251使囊腫組織內(nèi)PGP9.5的蛋白水平下降(0.67±0.03，P＜0.01)。在分離培養(yǎng)的DRG神經(jīng)元，CB1R激動劑ACPA和ACEA均可促進神經(jīng)突起外向生長，并呈劑量依賴性；CB1R受體阻斷劑AM251和AM