白介素1受體Ⅱ型在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生機制和生物治療中的作用研究.pdf

1、子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis，EMs)是一種常見的婦科疾病，累及約10％育齡期婦女。EMs是指有生長功能的子宮內(nèi)膜在子宮腔以外的部位生長。EMs發(fā)生機制至今不明，1927年Sampson提出了經(jīng)典的經(jīng)血逆流學說，而這一學說不能解釋為什么在70％-90％的生育期婦女發(fā)生經(jīng)血逆流而僅有10％導致了EMs。近年來研究表明EMs患者體內(nèi)活化的巨噬細胞、細胞因子和T/B細胞濃度明顯升高，所以有學者提出免疫炎癥學說、在位子宮內(nèi)膜發(fā)病學

2、說、腹腔內(nèi)膜細胞免疫清除學說等，有關細胞因子與發(fā)病關系的研究越來越受到重視。 細胞因子是免疫系統(tǒng)細胞間交通的主要調(diào)節(jié)因子，對于許多靶細胞具有增殖、抑制、趨化和分化等多種作用.其中白介素1(IL-1)在炎癥和免疫反應中起著關鍵的調(diào)節(jié)作用，大量研究顯示：EMs患者腹腔液中IL-1β mRNA表達增高，腹腔液中IL-1細胞因子濃度明顯升高。 我們前期研究發(fā)現(xiàn)白介素-1受體Ⅱ型(IL-1RⅡ)蛋白在EMs患者在位和異位子宮內(nèi)膜中

3、顯著低表達，其IL-1RⅡ mRNA表達在EMs患者亦顯著降低，特別是在疾病的早期階段，這種Ⅱ型受體可能是IL-1的負調(diào)節(jié)因子，它的改變可能與EMs的發(fā)生有關。我們的研究擬在在位子宮內(nèi)膜中超表達IL-1RⅡ，改變在位內(nèi)膜的生物學特性，降調(diào)節(jié)局部免疫炎癥環(huán)境中IL-1的生物學功能及其下游一系列免疫炎癥反應，探索EMs的發(fā)生機制和尋找新的生物學治療手段。 本研究首先論證了IL-1RII在EMs在位內(nèi)膜基質(zhì)細胞中的作用。我們檢測驗證了

4、sIL-1RII阻斷IL-1β刺激后的在位內(nèi)膜基質(zhì)細胞中與EMs發(fā)病機制密切相關的下游因子IL-6和IL-8的水平變化；構建了IL-1RⅡ重組腺病毒，感染內(nèi)膜基質(zhì)細胞高表達IL-1RⅡ，然后檢測IL-1刺激后內(nèi)膜細胞中IL一6和IL-8的水平變化，結果顯示IL-1β顯著刺激IL-6和IL-8的分泌，sIL-1RⅡ可以顯著阻斷IL-1β的作用(IL-6降低38.32％±5.71％；IL-8降低34.43％±8.08％，p<0.05)。IL

5、-1RⅡ重組腺病毒感染內(nèi)膜基質(zhì)細胞后可以顯著抑制IL-1p刺激IL-8的分泌水平(IL-8降低36.34％±11.2％，p<0.05)，同時我們采用二維電泳質(zhì)譜分析技術檢測了重組腺病毒組和PBS對照組之間的差異蛋白表達。 為了進一步驗證這一實驗結果，我們構建了EMs裸鼠模型，在動物模型上研究了sIL-1RII對于內(nèi)膜異位樣病灶的作用。結果表明sIL-1RⅡ可以抑制EMs裸鼠模型病灶生長(p>0.05)，減少病灶組織Bel-2 (

6、p<0.05)和VEGF表達(p<0.05)及腹腔液中VEGF(p>0.05)和IL-8(p<0.05)的表達。 我們的結果顯示IL-1RⅡ可以阻斷IL-1β對于EMs基質(zhì)細胞和裸鼠模型病灶中與發(fā)病機制有關的下游細胞因子的作用，并且研究了IL-1RⅡ在EMs免疫調(diào)節(jié)機制中的作用，提示IL-1RⅡ在EMs發(fā)生機制中具有重要作用，高表達IL-1RⅡ可能是治療EMs的一個新途徑。然而這些結果也表明EMs的發(fā)生是一個多因素過程，有眾多細