山東省副溶血性弧菌生物多態(tài)性和耐藥性研究.pdf

1、副溶血性弧菌于1951年在日本首次被發(fā)現(xiàn)，是一種典型的食源致病菌[1]。誤食副溶血性弧菌污染的產(chǎn)品會引發(fā)急性腸炎等食源性疾病，因感染副溶血性弧菌而致病的病例逐年高發(fā)，副溶血性弧菌已經(jīng)成為危害人類健康的主要致病菌，因此全面了解副溶血性弧菌的多態(tài)性和耐藥性等特點(diǎn)，對相關(guān)食源性疾病防控和治療具有重要的意義。
　　目的:通過對山東省副溶血性弧菌的分布調(diào)查、毒力因子分析、耐藥性分析、細(xì)菌血清型分析以及進(jìn)行生物學(xué)同源性比對，了解山東省副溶血性

2、弧菌的污染和分布情況，為食品安全和食品衛(wèi)生監(jiān)督提供依據(jù)，為構(gòu)建我省副溶血性弧菌的PFGE分型數(shù)據(jù)庫奠定了基礎(chǔ)，為食源性疾病的處理和預(yù)測給予了理論支持。
　　方法:對山東省17地市魚類、貝類、蝦類等動物性水產(chǎn)品和15家哨點(diǎn)醫(yī)院的腹瀉病人糞便樣本進(jìn)行副溶血性弧菌監(jiān)測并分離得到相應(yīng)食品分離株和臨床分離株;采用多重?zé)晒釶CR方法檢測分離得到的食品分離株和臨床分離株的毒力基因攜帶情況和基因分布;根據(jù)毒力基因篩選的結(jié)果，對毒力基因陽性食品分離

3、株和臨床分離株進(jìn)行8種抗生素的耐藥監(jiān)測和血清學(xué)鑒定;利用BioNumerics軟件對PFGE圖譜進(jìn)行聚類分析。
　　結(jié)果:山東省17地市農(nóng)貿(mào)市場、超市和酒店餐飲的魚類、貝類、蝦類等動物性水產(chǎn)品共計(jì)樣品1969份，檢出副溶血性弧菌210株，檢出率為10.69％，其中2013年的檢出率最高，不同水產(chǎn)品中貝類的檢出率最高，為18.03％。
　　15家哨點(diǎn)醫(yī)院腹瀉病人糞便樣本共計(jì)樣品3000份，檢出副溶血性弧菌97株，檢出率為3.2

4、％。共分離得到210株食品分離菌株和97株臨床分離株。
　　經(jīng)PCR檢測，322株食品分離菌株和97株臨床分離株tlh基因均陽性。食品分離株毒力基因陽性16份，攜帶率為4.97％(16/322)，均為攜帶一種毒力基兇。臨床分離株毒力基因陽性95份，攜帶率為97.94％(95/97)。95份攜帶毒力基因的臨床分離株中，攜帶一種毒力基因的菌株23份，占24.21％，攜帶兩種毒力基因的菌株60份，占63.16％，攜帶三種毒力基因的菌株1

5、2份，占12.63％。
　　101株食品分離株中有3株耐藥，耐藥率為2.97％，均為單一耐藥，其中頭孢西丁耐藥1株(0.99％)，甲氧芐氨嘧啶/磺胺甲嗯唑耐藥2株(1.98％);中介8株，中介率為7.92％，其中四環(huán)素2株(1.98％)，頭孢西丁6株(5.94％)。95株臨床分離株無耐藥株，中介2株，均為頭孢西丁，其他均為100％敏感。
　　血清型鑒定結(jié)果顯示，45株食品分離株中，鑒定出21株共17個血清型。其中O2∶K28

6、型3株，O11∶K22型2株，O5∶K30型2株，O2∶K3型等其它型別均為1株。97株臨床分離株鑒定出血清型8種，分屬在5個O群:O1、O2、O3、O4、O10，以O(shè)3∶K6為主，占64.95％，呈明顯優(yōu)勢。
　　進(jìn)行聚類分析后，sfiⅠ的酶切圖譜共分為9個群，其中G群包含的菌株數(shù)量最多，共60株，占臨床分離株的67.42％。說明臨床分離株的同源性較高，并且，臨床分離株中的優(yōu)勢菌株與其他菌株處于不同的聚類群。
　　結(jié)論:2