黃皮葉提取物對TNF-α分泌的影響及其機制.pdf

1、目的：研究黃皮葉提取物的抗炎作用及其在TLR4/MyD88/TRAF6信號通路中對細胞炎癥因子的調(diào)控。
　　方法：MTT法檢測黃皮葉提取物及LPS對細胞的抑制率；不同濃度、不同時間點LPS誘導活化RAW264.7細胞，復制炎癥細胞模型，RT-PCR、ELISA法檢測不同濃度、不同時間點時TNF-a分泌情況；RT-PCR、ELISA法檢測黃皮葉提取物處理后TNF-a mRNA表達及分泌情況；根據(jù)實驗需要進行實驗分組：正常組、LPS組

2、、LPS+MyD88抑制劑組、LPS+黃皮葉提取物組、LPS+黃皮葉提取物+MyD88抑制劑組， TLR4/MyD88/TRAF6信號通路中的相關炎癥因子通過 RT-PCR、Western Blot法檢測。
　　結果：不同濃度黃皮葉提取物(25u、50、100ug/mL)及 LPS（1ng/mL）均對細胞生長無明顯抑制；不同濃度LPS(0.1、1、10、100ng/mL)均能誘導RAW264.7細胞分泌TNF-a，其中在LPS濃度

3、為1ng/mL的時候TNF-a分泌最多；以LPS（1ng/mL）在不同時間（4、8、12、24、48h）刺激RAW264.7細胞，結果顯示隨著時間的增加TNF-a分泌及mRNA表達增加；黃皮葉提取物能降低炎癥因子（TLR4、MyD88、TRAF6、TNF-a）表達，且濃度越高抗炎效果越強；通過分組實驗結果發(fā)現(xiàn)黃皮葉提取物可能主要通過 MyD88依賴途徑抗炎，MyD88抑制劑與黃皮葉提取物協(xié)同抗炎作用。
　　結論：黃皮葉提取物具有抑