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文檔簡介
1、目的:構(gòu)建SD大鼠酒精性肝病的動物模型,并灌胃梔子提取物進行干預,然后通過測試實驗大鼠的血清脂質(zhì)總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)的水平,測定肝臟指數(shù)及肝臟組織中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的含量,再觀測肝臟組織腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)蛋白表達和基因轉(zhuǎn)錄水平以及大鼠肝細胞脂肪變情況,以便探研酒精性肝病的病理機制及梔子提取
2、物對其病變的影響。
方法:五十只健康的SD雄性大鼠,隨機分為五組(n=10),正常對照組(對照組)、酒精性肝病模型組(模型組)、梔子提取物低劑量組(低劑量組)、梔子提取物中劑量組(中劑量組)和梔子提取物高劑量組(高劑量組)。除了對照組大鼠給予普通飼料和清潔飲用水外,其余各組均每天給予高脂飼料和56%乙醇15ml/kg每天灌胃,各藥物劑量組同時每天再添加低、中、高劑量的梔子提取物灌胃,共連續(xù)飼養(yǎng)8周。然后分別麻醉動物,取材制備實
3、驗動物標本。(1)采取肝臟用電子天平稱重,計算肝指數(shù);(2)采用生化法檢測血清的TC、TG、ALT和AST,并用試劑盒檢測大鼠肝臟中GSH-Px和MDA的含量;(3)通過HE染色、免疫組化染色法分別用光鏡觀察肝組織的形態(tài)變化和TNF-α、IL-6的表達變化陽性指標;(4)提取肝臟組織的RNA,通過熒光定量RT-PCR法分別檢測肝組織中TNF-α和IL-6 mRNA的基因轉(zhuǎn)錄水平。
結(jié)果:(1)動物用藥8周后,計算大鼠肝指數(shù),發(fā)
4、現(xiàn)模型組較對照組的肝指數(shù)增高(P<0.05),各藥物組肝指數(shù)較模型組則明顯降低(P<0.05)。(2)模型組大鼠血清的 TC、TG含量明顯高于對照組(P<0.05),各藥物組與模型組比較,血清脂質(zhì)明顯降低(P<0.05),模型組肝功能ALT、AST值明顯較高于對照組(P<0.05),各藥物組肝功能指標則低于模型組(P<0.05);肝臟MDA含量模型組明顯高于對照組(P<0.05),各藥物組 MDA含量較模型組顯著降低(P<0.05);模
5、型組 GSH-Px含量明顯低于對照組(P<0.05),藥物組GSH-Px含量明顯比模型組提高(P<0.05)。(3)HE染色光鏡下觀察,各藥物組的肝細胞脂肪變程度相比模型組大鼠而言有明顯改善;免疫組化染色結(jié)果顯示模型組較對照組大鼠肝臟組織的TNF-α、IL-6表達增多(P<0.05),各藥物組明顯比模型組降低(P<0.05)。(4)RT-PCR結(jié)果表明,模型組肝組織內(nèi) TNF-α、IL-6 mRNA的基因表達量均明顯高于對照組,也高于各
6、藥物組(P<0.05)。
結(jié)論:(1)成功建立了SD大鼠酒精性肝臟損害的模型,并應用了梔子提取物來干預改善模型組大鼠的肝損害。(2)模型組大鼠的血清TC、TG、ALT、AST水平和MDA含量升高,GSH-Px含量下降;利用梔子提取物來進行藥物干預,可以使血清TC、TG、ALT、AST水平和MDA含量降低,GSH-Px含量升高。(3)模型組大鼠肝組織的TNF-α、IL-6基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達升高,采用梔子提取物的藥物干預可使其降低
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