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文檔簡介
1、目的:運用D-氨基半乳糖(D-GalN)+內(nèi)毒素(LPS)構(gòu)建大鼠急性肝衰竭模型,研究解毒化瘀顆粒對急性肝衰竭大鼠腫瘤壞死因子α(Tumornecrosis factor,TNF-α)、白細胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白細胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)的分泌量及mRNA表達量的影響,從炎癥因子角度探討解毒化瘀顆粒對急性肝衰竭大鼠免疫網(wǎng)絡(luò)的細胞因子調(diào)節(jié)作用。
方法:將SPF級雄性
2、Wistar大鼠120只,按照隨機數(shù)字表法隨機分6組。分別為正常組、模型組、解毒化瘀顆粒低劑量組(低劑量組)、解毒化瘀顆粒中劑量組(中劑量組)、解毒化瘀顆粒高劑量組(高劑量組)、E5531組,每組各20只。除正常組外,其余各組均給與D-GalN600mg/kg+LPS20μg/kg的劑量,一次性腹腔注射建立急性肝衰竭大鼠模型,正常組予以等量的生理鹽水腹腔注射。解毒化瘀顆粒低、中、高劑量組所有大鼠于造模前5天以解毒化瘀顆粒溶液不同劑量進行
3、灌胃,E5331(為類脂A結(jié)構(gòu)類似物,可競爭性拮抗LPS與受體結(jié)合,為LPS拮抗劑)組給藥劑量為10mg/kg,配成1μg/ml濃度的溶液灌胃,正常組、模型組大鼠以等量生理鹽水灌胃。每12h一次,2次/d,直至處死。在造模成功48h采樣,(1)采用全自動生化檢測系統(tǒng)測血清ALT、AST、TBIL含量的變化;(2) ELISA技術(shù)檢測血清TNF-α、IL-6、IL-10水平;(3)采用RT-PCR技術(shù)檢測肝組織TNF-α、IL-6、IL-
4、10mRNA表達;(4)應(yīng)用蘇木素伊紅(hematoxylin and eosin,HE)染色觀察肝臟病理組織學(xué)改變;(5)觀察各組大鼠在造模后48h存活率。
結(jié)果:
1.肝功能結(jié)果:與正常組相比,模型組及各藥物干預(yù)組ALT、AST、TBIL均顯著升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與模型組比較,各藥物干預(yù)組ALT、AST、TBIL均顯著降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),與E5531組比較,僅高劑量組A
5、LT、AST、TBIL下降顯著,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
2.肝組織病理結(jié)果:解毒化瘀顆粒低、中、高劑量組的肝組織損傷程度均較模型組輕,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
3.細胞因子結(jié)果:與模型組比較,解毒化瘀顆粒低、中、高劑量組TNF-α、IL-6水平及mRNA表達顯著降低,IL-10水平和mRNA表達升高,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
4.解毒化瘀顆粒各劑量組與模型組比較,肝衰
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