基于破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞調(diào)控通路探討左、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠骨質(zhì)疏松癥的作用差異及其機(jī)制.pdf

1、目的：從OPG/RANKL破骨細(xì)胞調(diào)控通路和Wnt/LRP-5/β-catenin成骨細(xì)胞調(diào)控通路的角度，揭示具有滋補(bǔ)腎陰作用的左歸丸和具有溫補(bǔ)腎陽(yáng)作用的右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠骨質(zhì)疏松癥的作用差異及其機(jī)制，以探討“腎主骨”是否存在性別差異以及產(chǎn)生差異的機(jī)理，進(jìn)一步闡明“腎主骨”的科學(xué)內(nèi)涵，并為采用中醫(yī)治療骨質(zhì)疏松癥的臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：選用同周齡SD大鼠160只，SPF級(jí)，雌雄各半，先隨機(jī)分為6組:雌、雄性空白對(duì)照

2、組各12只，雌、雄性假手術(shù)組各12只，雌、雄性造模組各56只。于去勢(shì)術(shù)前，先用Osteocore3 Digital2D骨密度儀（雙能X線）掃描所有大鼠腰椎4-6(L4-6) BMD，得到掃描圖像待分析。之后分別對(duì)兩組造模組大鼠行去勢(shì)手術(shù)，即對(duì)雌性造模組大鼠切除卵巢，對(duì)雄性造模組大鼠切除睪丸（其中雄性假手術(shù)組1只、造模組雌、雄性大鼠各3只因手術(shù)麻醉死亡）。術(shù)后，再將兩組造模組大鼠按體重隨機(jī)分為8組:卵巢切除組（OVX組）13只、睪丸切除(

3、ORX組)14只、戊酸雌二醇組（E2組）14只，甲睪酮組（T組）、雌、雄性左歸丸組、雌、雄性右歸丸組各13只。
　　OVX大鼠OP模型制作:采用戊巴比妥鈉腹腔注射全身麻醉雌性大鼠后，摘除雙側(cè)卵巢;雌性假手術(shù)組也施行開(kāi)關(guān)腹腔手術(shù)，但未摘除卵巢，只摘除少量卵巢周?chē)窘M織。ORX大鼠OP模型制作:用戊巴比妥鈉腹腔注射全身麻醉雄性大鼠后，分離雙側(cè)睪丸和附睪并切除雙側(cè)睪丸;雄性假手術(shù)組也用同樣的方法找到并剝離雙側(cè)睪丸，但不摘除。
　

4、　術(shù)后10天，對(duì)各給藥組大鼠灌胃給藥:雌、雄性左歸丸組大鼠灌服左歸丸水煎液，給藥濃度為0.968g生藥/ml;雌、雄性右歸丸組大鼠灌服右歸丸水煎液，給藥濃度為1.024g生藥/ml;戊酸雌二醇組大鼠灌服戊酸雌二醇水溶液，濃度為0.0092 mg/ml;甲睪酮組大鼠灌服甲睪酮水溶液，濃度為0.092mg/ml。以上給藥體積均為1ml/100g體重，每周稱(chēng)重一次，根據(jù)體重調(diào)整給藥體積，每天固定時(shí)間（下午2點(diǎn)）給藥，連續(xù)6天，休息1天后，再連

5、續(xù)給藥6天，如此給藥3個(gè)月。雌、雄空白對(duì)照組，雌、雄假手術(shù)組，OVX組、ORX組大鼠按上法灌服等體積的純凈水（雌性右歸丸組和雄性左歸丸組各有1只大鼠因灌胃操作不慎死亡）。
　　各組大鼠分別于處死前16天和前3天，腹腔注射鹽酸四環(huán)素（劑量為30mg/kg體重），對(duì)骨組織進(jìn)行熒光雙標(biāo)記。給藥結(jié)束后，將大鼠用戊巴比妥鈉腹腔注射進(jìn)行全身麻醉，用骨密度儀掃描大鼠L4-6 BMD，得到掃描圖像待分析。然后，再將各組大鼠迅速處死，取右側(cè)脛骨近端

6、1/3，制作不脫鈣骨切片，用于骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)指標(biāo)的檢測(cè);取左側(cè)脛骨近端1/3，制作脫鈣骨冰凍切片，采用免疫組化法和原位雜交法分別檢測(cè)OPG、RANKL、Wnt1、LRP-5、β-Catenin蛋白及其mRNA的檢測(cè)。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件，若數(shù)據(jù)為正態(tài)分布時(shí)，采用單因素方差分析(ANOVA)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，方差齊性時(shí)組間兩兩比較，采用LSD檢驗(yàn);方差不齊時(shí)采用Dunnett

7、's T3(3)檢驗(yàn);若數(shù)據(jù)為非正態(tài)分布時(shí)，采用非參數(shù)檢驗(yàn)Kruskal-Wallis單因素ANOVA(k樣本)(W);配對(duì)數(shù)據(jù)對(duì)比采用配對(duì)樣本T檢驗(yàn)。
　　結(jié)果：
　　1.左、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠腰椎BMD及骨丟失率的影響除T組外，其余各組大鼠給藥后腰椎BMD與去勢(shì)前相比均有明顯差異(P＜0.05或P＜0.01)。
　　相同性別大鼠給藥后腰椎BMD組間比較:模型組（OVX組、ORX組）較假手術(shù)組顯著降低;E2組、

8、雌性左歸丸組、雌性右歸丸組大鼠腰椎BMD均較OVX組顯著增高，但仍低于假手術(shù)組;與ORX組相比，T組、雄性右歸丸組大鼠腰椎BMD顯著增高，雄性左歸丸組則無(wú)顯著差異，但均低于假手術(shù)組。其中，雌性左歸丸組與雌性右歸丸組、雄性左歸丸組與雄性右歸丸組之間均存在明顯差異，且后者高于前者。
　　相同性別大鼠給藥后腰椎骨丟失率組間比較，結(jié)果顯示:模型組（OVX組、ORX組）大鼠腰椎骨丟失較假手術(shù)組顯著增加;E2組、雌性左歸丸組、雌性右歸丸組大鼠

9、腰椎骨丟失均較OVX組顯著減少，但仍明顯多于假手術(shù)組;與ORX組相比，T組、雄性右歸丸組大鼠腰椎骨丟失顯著減少，雄性左歸丸組則無(wú)顯著差異，但均仍多于假手術(shù)組。其中，雌性左歸丸組與雌性右歸丸組、雄性左歸丸組與雄性右歸丸組之間骨丟失率均存在明顯差異，且后者低于前者。
　　不同性別大鼠給藥后腰椎骨丟失率組間比較，結(jié)果顯示:雌性與雄性假手術(shù)組、OVX組與ORX組、雌性與雄性左歸丸組、雌性與雄性右歸丸組之間骨丟失均有顯著差異。其中OVX組骨

10、丟失明顯多于ORX組(P＜0.01)，雄性左歸丸組則明顯多于雌性左歸丸組（P＜0.05）、雄性右歸丸組則明顯多于雌性右歸丸組(P＜0.01)，但雌性假手術(shù)組骨量增加明顯低于雄性假手術(shù)組(P＜0.05)。
　　2.左、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)指標(biāo)的影響
　　2.1 左、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠脛骨TBV％及骨丟失率的影響相同性別大鼠脛骨TBV％組間比較:模型組（OVX組、ORX組）較假手術(shù)組顯著降低;雄性左歸丸

11、組與ORX組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，其余各給藥組均較同性別模型組顯著升高，但仍明顯低于同性別假手術(shù)組。其中，雌性右歸丸組高于雌性左歸丸組，雄性右歸丸組高于雄性左歸丸組，且之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　不同性別大鼠脛骨TBV％組間比較:雌性假手術(shù)組與雄性假手術(shù)組、OVX組與ORX組之間具有顯著差異，且均為后者高于前者。
　　相同性別大鼠脛骨骨丟失率組間比較，結(jié)果顯示:模型組（OVX組、ORX組）骨量丟失明顯多于假手術(shù)組

12、;雄性左歸丸組骨量丟失與ORX組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），其余各給藥組均較同性別模型組骨量丟失顯著減少，但仍明顯多于同性別假手術(shù)組。其中，雌性右歸丸組骨量丟失明顯少于雌性左歸丸組(P＜0.01)，雄性右歸丸組明顯少于雄性左歸丸組(P＜0.05)。
　　不同性別大鼠脛骨骨丟失率組間比較，結(jié)果顯示:雌性與雄性假手術(shù)組、OVX組與ORX組、雌性與雄性左歸丸組、雌性與雄性右歸丸組之間骨量丟失均存在顯著差異。其中OVX組骨量丟失明顯

13、多于ORX組(P＜0.05)，雄性左歸丸組則明顯多于雌性左歸丸組(P＜0.05)、雄性右歸丸組則明顯多于雌性右歸丸組(P＜0.05)，但雌性假手術(shù)組骨量增加明顯低于雄性假手術(shù)組(P＜0.05)。
　　2.2 左、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠脛骨TRS％、TFS％及TRS/TFS比值的影響相同性別組間比較:模型組（OVX組、ORX組）大鼠脛骨TRS％、TFS％及TRS/TFS比值均較同性別假手術(shù)組明顯升高。各給藥組中，E2組、T組和雌性

14、右歸丸組上述參數(shù)均較同性別模型組顯著降低，且均與同性別假手術(shù)組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;雌性左歸丸組大鼠脛骨上述參數(shù)也明顯低于OVX組，但仍高于雌性假手術(shù)組，且二者存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;雄性左歸丸組大鼠脛骨上述參數(shù)與ORX組相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;而雄性右歸丸組大鼠脛骨上述參數(shù)較ORX組明顯降低，但仍明顯高于雄性假手術(shù)組。兩種中藥治療組中，雌性右歸丸組與雌性左歸丸、雄性右歸丸組與雄性左歸丸組大鼠脛骨上述參數(shù)相比，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且前者明顯低于后者。
　

15、　不同性別大鼠脛骨TRS％、TFS％及TRS/TFS比值組間比較，結(jié)果顯示:雌、雄性假手術(shù)組、模型組(OVX組和ORX組)、左歸丸組和右歸丸組之間上述參數(shù)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其中，TFS％比較，雌性假手術(shù)組低于雄性假手術(shù)組，OVX組高于ORX組，雌性左歸丸低于雄性左歸丸，雌性右歸丸低于雄性右歸丸;與之對(duì)應(yīng)，TRS％比較，雌性假手術(shù)組高于雄性假手術(shù)組，OVX組高于ORX組，雌性左歸丸低于雄性左歸丸，雌性右歸丸低于雄性右歸丸;TRS/TFS比值

16、比較，雌性假手術(shù)組高于雄性假手術(shù)組，OVX組高于ORX組，雌性左歸丸組低于雄性左歸丸組，雌性右歸丸組低于雄性右歸丸組。
　　2.3 左、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠脛骨OSW、MAR和mAR的影響相同性別組間比較:模型組（OVX組、ORX組）大鼠脛骨OSW、MAR和mAR與同性別假手術(shù)組相比，顯著增高。各給藥組中，與同性別模型組(OVX組、ORX組)相比，E2組、T組和雌性右歸丸組上述參數(shù)均顯著下降，且與同性別假手術(shù)組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;與

17、OVX組相比，雌性左歸丸組大鼠脛骨上述參數(shù)明顯降低，但仍明顯高于雌性假手術(shù)組;與ORX組相比，雄性左歸丸組大鼠脛骨上述參數(shù)與之無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而雄性右歸丸組較之明顯下降，但仍明顯高于雄性假手術(shù)組;與同性別左歸丸組比較，雌性、雄性右歸丸組MAR和mAR均明顯降低，雄性右歸丸組OSW較雄性左歸丸組明顯降低，雌性右歸丸組OSW較雌性左歸丸組有降低趨勢(shì)(P=0.054)。
　　不同性別大鼠組間比較，結(jié)果顯示:模型組(OVX組和ORX組)、左

18、歸丸組和右歸丸組兩種性別之間上述參數(shù)均存在差異(P＜0.05或P＜0.01)。其中，OVX組高于ORX組，雌性左歸丸組低于雄性左歸丸組，雌性右歸丸組低于雄性右歸丸組。假手術(shù)組之間比較，OSW雌性較雄性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，但有降低趨勢(shì);MAR和mAR則雌性顯著低于雄性(P＜0.05或P＜0.01)。
　　3.左、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠脛骨骨髓中OPG、RANKL蛋白和mRNA表達(dá)以及RANKL/OPG和RANKLmRNA

19、/OPGmRNA比值的影響
　　3.1 左、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠脛骨骨髓OPG蛋白和mRNA表達(dá)的影響相同性別組間進(jìn)行比較，結(jié)果顯示:與同性別假手術(shù)組相比，模型組(OVX組、ORX組)大鼠脛骨骨髓OPG蛋白和mRNA表達(dá)陽(yáng)性密度均顯著降低;與同性別模型組（OVX組、ORX組）相比，E2組、T組和雌性右歸丸組陽(yáng)性密度均顯著增高，且與同性別假手術(shù)組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;與OVX組相比，雌性左歸丸組陽(yáng)性密度明顯升高，但仍明顯低于雌性假手術(shù)組

20、;與ORX組相比，雄性左、右歸丸組OPG蛋白和mRNA表達(dá)陽(yáng)性密度與其均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　不同性別組間大鼠脛骨骨髓OPG蛋白和mRNA表達(dá)陽(yáng)性密度進(jìn)行比較，結(jié)果顯示:雌性假手術(shù)組低于雄性假手術(shù)組，OVX組低于ORX組，雌性左歸丸組高于雄性左歸丸組，雌性右歸丸組高于雄性右歸丸組，且兩者之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05或P＜0.01)。
　　3.2 左、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠脛骨骨髓RANKL蛋白和mRNA表達(dá)

21、的影響相同性別組間進(jìn)行比較，結(jié)果顯示:與同性別假手術(shù)組相比，模型組(OVX組、ORX組)大鼠脛骨骨髓RANKL蛋白和mRNA表達(dá)陽(yáng)性密度均顯著升高;與同性別模型組（OVX組、ORX組）相比，E2組、T組和雌性右歸丸組陽(yáng)性密度均顯著減低，且與同性別假手術(shù)組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;與OVX組相比，雌性左歸丸組陽(yáng)性密度明顯減低，但仍明顯高于雌性假手術(shù)組;與ORX組相比，雄性左歸丸組陽(yáng)性密度與其無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而雄性右歸丸組較之明顯減低，但仍明顯高于雄性假

22、手術(shù)組。
　　不同性別組間大鼠脛骨骨髓RANKL蛋白和mRNA表達(dá)陽(yáng)性密度進(jìn)行比較，結(jié)果顯示:雌性假手術(shù)組高于雄性假手術(shù)組，OVX組高于ORX組，雌性左歸丸組低于雄性左歸丸組，雌性右歸丸組低于雄性右歸丸組，且兩者之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05或P＜0.01)。
　　3.3 左、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠脛骨骨髓RANKL/OPG和RANKLmRNA/OPGmRNA比值的影響相同性別組間進(jìn)行比較，結(jié)果顯示:與同性別假手術(shù)組相比，

23、模型組(OVX組、ORX組)大鼠脛骨骨髓RANKL/OPG和RANKLmRNA/OPGmRNA比值均顯著升高;與同性別模型組（OVX組、ORX組）相比，E2組、T組和雌性右歸丸組陽(yáng)性密度均顯著減低，且與同性別假手術(shù)組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;與OVX組相比，雌性左歸丸組陽(yáng)性密度明顯減低，但仍明顯高于雌性假手術(shù)組;與ORX組相比，雄性左歸丸組陽(yáng)性密度與其無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而雄性右歸丸組較之明顯減低，但仍明顯高于雄性假手術(shù)組。
　　不同性別組間大鼠脛

24、骨骨髓RANKL/OPG和RANKLmRNA/OPGmRNA比值進(jìn)行比較，結(jié)果顯示:雌性假手術(shù)組高于雄性假手術(shù)組，OVX組高于ORX組，雌性左歸丸組低于雄性左歸丸組，雌性右歸丸組低于雄性右歸丸組，且兩者之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05或P＜0.01)。
　　4.左、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠脛骨骨髓中Wnt1、LRP-5及β-catenin蛋白和mRNA表達(dá)的影響
　　4.1 左、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠脛骨骨髓Wnt1蛋白和m

25、RNA表達(dá)的影響相同性別組間進(jìn)行比較，結(jié)果顯示:與同性別假手術(shù)組相比，模型組(OVX組、ORX組)大鼠脛骨骨髓Wnt1蛋白和mRNA表達(dá)陽(yáng)性密度均顯著增高;與同性別模型組（OVX組、ORX組）相比，E2組、T組和雌性右歸丸組陽(yáng)性密度均顯著降低，且與同性別假手術(shù)組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;與OVX組相比，雌性左歸丸組陽(yáng)性密度明顯減低，但仍明顯高于雌性假手術(shù)組;與ORX組相比，雄性左歸丸組陽(yáng)性密度與其無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而雄性右歸丸組較之明顯減低，但仍明顯高

26、于雄性假手術(shù)組。
　　不同性別組間大鼠脛骨骨髓Wnt1蛋白和mRNA表達(dá)陽(yáng)性密度進(jìn)行比較，結(jié)果顯示:雌性假手術(shù)組低于雄性假手術(shù)組，OVX組高于ORX組，雌性左歸丸組低于雄性左歸丸組，雌性右歸丸組低于雄性右歸丸組，且兩者之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05或P＜0.01)。
　　4.2 左、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠脛骨骨髓LRP-5蛋白和mRNA表達(dá)的影響相同性別組間進(jìn)行比較，結(jié)果顯示:與同性別假手術(shù)組相比，模型組(OVX組、ORX

27、組)大鼠脛骨骨髓LRP-5蛋白和mRNA表達(dá)陽(yáng)性密度均顯著升高;與同性別模型組（OVX組、ORX組）相比，E2組、T組和雌性右歸丸組陽(yáng)性密度均顯著降低，且與同性別假手術(shù)組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;與OVX組相比，雌性左歸丸組陽(yáng)性密度明顯降低，但仍明顯高于雌性假手術(shù)組;與ORX組相比，雄性左歸丸組陽(yáng)性密度與其無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而雄性右歸丸組較之明顯降低，但仍明顯高于雄性假手術(shù)組。
　　不同性別組間大鼠脛骨骨髓LRP-5蛋白和mRNA表達(dá)陽(yáng)性密度進(jìn)行

28、比較，結(jié)果顯示:雌性假手術(shù)組低于雄性假手術(shù)組，OVX組高于ORX組，雌性左歸丸組低于雄性左歸丸組，雌性右歸丸組低于雄性右歸丸組，且兩者之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05或P＜0.01)。
　　4.3 左、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠脛骨骨髓β-catenin蛋白和mRNA表達(dá)的影響相同性別組間進(jìn)行比較，結(jié)果顯示:與同性別假手術(shù)組相比，模型組(OVX組、ORX組)大鼠脛骨骨髓β-catenin蛋白和mRNA表達(dá)陽(yáng)性密度均顯著增高;與同性別模

29、型組（OVX組、ORX組）相比，E2組、T組和雌性右歸丸組陽(yáng)性密度均顯著減低，且與同性別假手術(shù)組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;與OVX組相比，雌性左歸丸組陽(yáng)性密度明顯減少，但仍明顯高于雌性假手術(shù)組;與ORX組相比，雄性左歸丸組陽(yáng)性密度與其無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而雄性右歸丸組較之明顯減少，但仍明顯高于雄性假手術(shù)組。
　　不同性別組間大鼠脛骨骨髓β-catenin蛋白和mRNA表達(dá)陽(yáng)性密度進(jìn)行比較，結(jié)果顯示:雌性假手術(shù)組低于雄性假手術(shù)組，OVX組高于ORX組

30、，雌性左歸丸組低于雄性左歸丸組，雌性右歸丸組低于雄性右歸丸組，且兩者之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05或P＜0.01)。
　　結(jié)論：
　　1.去勢(shì)均可導(dǎo)致同齡不同性別大鼠發(fā)生高轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松癥，即骨吸收和骨形成均增加，但由于骨吸收大于骨形成，而使骨量丟失。所不同的是，OVX大鼠的骨轉(zhuǎn)換率顯著高于ORX大鼠，骨丟失率也明顯高于后者。OVX大鼠和ORX大鼠骨髓中RANKL表達(dá)均顯著上調(diào)，而OPG表達(dá)均顯著下調(diào)，兩者的比值(RANKL

31、/OPG)也均明顯增高，從而使破骨細(xì)胞的活性增強(qiáng)，骨吸收增加;同時(shí)，Wnt1、LRP-5和β-catenin表達(dá)均顯著上調(diào)，從而使成骨細(xì)胞的活性增強(qiáng)，骨形成增加。但由于破骨細(xì)胞活性增強(qiáng)的幅度大于成骨細(xì)胞活性增強(qiáng)的幅度，而導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生;去勢(shì)所致的雌性大鼠的上述改變明顯強(qiáng)于去勢(shì)的雄性大鼠。這是去勢(shì)均可導(dǎo)致雌、雄大鼠發(fā)生高轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松癥，但雌性大鼠的骨轉(zhuǎn)換以及骨丟失率明顯高于雄性的機(jī)理之一。
　　2.左歸丸、右歸丸對(duì)不同性別去

32、勢(shì)大鼠骨質(zhì)疏松癥的作用存在明顯差異:左歸丸對(duì)OVX大鼠骨質(zhì)疏松癥具有明顯的療效，而對(duì)ORX大鼠骨質(zhì)疏松癥沒(méi)有療效;右歸丸對(duì)OVX大鼠和ORX大鼠骨質(zhì)疏松癥雖均有明顯的療效，但對(duì)OVX大鼠的療效要明顯優(yōu)于ORX大鼠。
　　3.左歸丸、右歸丸對(duì)不同性別去勢(shì)大鼠骨質(zhì)疏松癥的作用產(chǎn)生差異的機(jī)制:(1)左歸丸產(chǎn)生差異的機(jī)制是，左歸丸能使OVX骨質(zhì)疏松癥大鼠骨髓中RANKL表達(dá)顯著下調(diào)，而使OPG表達(dá)顯著上調(diào);同時(shí)，使Wnt1、LRP-5和β

33、-catenin表達(dá)顯著下調(diào);通過(guò)此作用，導(dǎo)致骨吸收與骨形成均降低，抑制骨的高轉(zhuǎn)換，使骨吸收與骨形成達(dá)到相對(duì)的平衡狀態(tài)，從而防止骨量的丟失。而左歸丸對(duì)ORX骨質(zhì)疏松癥大鼠骨髓中的以上關(guān)鍵因子無(wú)明顯影響。(2)右歸丸產(chǎn)生差異的機(jī)制是，右歸丸對(duì)OVX骨質(zhì)疏松癥大鼠骨髓中OPG、RANKL以及Wnt1、LRP-5和β-catenin的作用與左歸丸的相同，只是右歸丸的作用強(qiáng)度要明顯高于左歸丸。右歸丸能使ORX骨質(zhì)疏松癥大鼠骨髓中RANKL以及W

34、nt1、LRP-5和β-catenin表達(dá)均顯著下調(diào);但對(duì)OPG表達(dá)無(wú)明顯影響，并且對(duì)RANKL、Wnt1、LRP-5和β-catenin的作用要明顯弱于對(duì)OVX骨質(zhì)疏松癥大鼠的作用，從而造成右歸丸對(duì)OVX骨質(zhì)疏松癥大鼠骨的高轉(zhuǎn)換的抑制作用要明顯強(qiáng)于對(duì)ORX骨質(zhì)疏松癥大鼠，進(jìn)而導(dǎo)致其對(duì)前者骨質(zhì)疏松癥的療效要明顯優(yōu)于后者。
　　4.以上結(jié)果表明，“腎主骨”存在性別差異，OPG/RANKL破骨細(xì)胞調(diào)控通路和Wnt/LRP-5/β-ca