四神丸對伊立替康所致的小鼠遲發(fā)性腹瀉防治作用的實驗研究.pdf

1、目的：遲發(fā)性腹瀉為伊立替康(Irinotecan，CPT-11)主要劑量限制性毒性，嚴重影響患者的生活質量，甚至導致治療中斷，影響患者的療效。目前依然缺乏較滿意的防治方法。在本項研究中，建立小鼠CPT-11所致遲發(fā)性腹瀉模型，研究四神丸各劑量組對CPT-11引起的遲發(fā)性腹瀉的防治作用，并探討其可能的機制。
　　方法：⑴遲發(fā)性腹瀉模型的建立。50只健康雄性ICR小鼠被隨機分為5組:腹瀉模型組、四神丸低（0.6g·kg-1）、中(1.

2、2g·kg-1)、高（2.4g·kg-1）劑量組、正常對照組，每組10只。腹瀉模型組及四神丸各劑量組均尾靜脈注射CPT-11（35mg·kg-1·d-1），每日1次，連續(xù)4日;正常對照組小鼠尾靜脈被注射同等體積生理鹽水。四神丸各劑量組于造模前一天灌胃給藥，每日1次，連續(xù)7日，腹瀉模型組及正常對照組小鼠被給予同等體積雙蒸水灌胃。⑵每日觀察、記錄小鼠遲發(fā)性腹瀉發(fā)生的情況、飲食及精神活動狀態(tài)等。⑶樣本采集小鼠末次灌胃給藥24h后，腹腔注射水合

3、氯醛麻醉，腹主動脈取血;斷頸后處死，取結腸組織及盲腸內(nèi)容物。⑷樣本的檢測。通過酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)檢測小鼠血樣中的白介素1β(Interleukin-1β，IL-1β)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)的含量；比色法檢測盲腸內(nèi)容物β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase，β-G)的表達水平；盲腸內(nèi)容物大腸桿

4、菌培養(yǎng)，計數(shù)菌落數(shù)；結腸組織被固定、切片、HE染色后，于顯微鏡下觀察結腸粘膜的結構和形態(tài)。
　　結果：①小鼠尾靜脈注射CPT-11后，于24h后出現(xiàn)遲發(fā)性腹瀉，腹瀉模型組小鼠發(fā)生遲發(fā)性腹瀉率為100％，其中重度腹瀉發(fā)生率為80％;四神丸中、高劑量組重度腹瀉發(fā)生率分別為40％;與腹瀉模型組比較:四神丸中、高劑量組腹瀉程度明顯減輕(P=0.021，P=0.019)。②腹瀉模型組小鼠5-6級粘膜損傷發(fā)生率為70％，而四神丸中、高劑量組均

5、為30％，與腹瀉模型組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。③四神丸中高劑量組血清IL-1β分別為:（72.61±10.15）/g·L-1，（71.86±8.78）/g·L-1較腹瀉模型組（116.57±17.16）/g·L-1的水平顯著降低(P＜0.01)。④四神丸中高劑量組血清TNF-α分別為:（71.50±3.39）/g·L-1，（69.43±6.23）/g·L-1較腹瀉模型組（109.50±4.21）/g·L-1的水平顯著降低

6、(P＜0.01)。⑤四神丸中、高劑量組腸道β-G分別為:（1.109±0.055）U，（1.100±0.063）U;較腹瀉模型組（1.438±0.022）U的表達顯著降低(P＜0.01)。⑥四神丸低中高劑量組分別為（29.5±2.2）×1013/g，（30.4±3.5）×1013/g，(31.4±2.7)×1013/g;腹瀉模型組（31.4±3.2）×1013/g;正常對照組（31.2±2.9）×1013/g。各組之間比較，菌落數(shù)無明顯