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1、成簇的規(guī)律間隔短回文重復(fù)序列(Clustered regularly interspaced short palindromicrepeats,CRISPR)是大多數(shù)細(xì)菌和古菌在生存壓力下進(jìn)化出的一套抵抗噬菌體干擾的防御系統(tǒng)。本研究首先根據(jù)VFDB、PHI-base和NMPDR病原菌數(shù)據(jù)庫確定了CRISPR數(shù)據(jù)庫中2612株細(xì)菌中的549株病原菌菌株。然后通過BLAST比對,對病原菌菌株和總菌株的CRISPR結(jié)構(gòu)中的間隔序列單元數(shù)和間隔
2、序列的來源進(jìn)行了比較分析。最后通過clustalw、MEGA5.0軟件和RNAstructure網(wǎng)站,對在病毒數(shù)據(jù)庫中比對成功的50株病原菌菌株的109個CRISPR位點進(jìn)行側(cè)翼序列的多序列對比和重復(fù)序列的RNA二級結(jié)構(gòu)預(yù)測。
對病原菌菌株和總菌株的CRISPR結(jié)構(gòu)中的間隔序列數(shù)量單元和間隔序列來源的比較分析結(jié)果顯示:病原菌菌株的CRISPR結(jié)構(gòu)和總菌株存在差異,具體表現(xiàn)為,含有CRISPR結(jié)構(gòu)的菌株在病原菌菌株中的比例為48
3、.5%,略高于總菌株中的比例;間隔序列的數(shù)量在總菌株和病原菌菌株中的差異顯著,病原菌菌株間隔序列分布情況均低于細(xì)菌的平均水平;病原菌菌株CRISPR結(jié)構(gòu)中病毒來源的間隔序列比質(zhì)粒來源所占比例大。
對50株病原菌菌株的109個CRISPR位點的側(cè)翼序列的多序列比對和RNA二級結(jié)構(gòu)預(yù)測結(jié)果顯示:可以將109個CRISPR位點分為5個組,但相同病原菌菌株不同CRISPR位點的側(cè)翼序列在進(jìn)化中呈現(xiàn)不同的分組。同時也在側(cè)翼序列中找到一段
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