魚(yú)類病原菌蛭弧菌的研究.pdf

1、蛭弧菌是一類專門(mén)以捕食其他細(xì)菌，特別是革蘭氏陰性細(xì)菌為生的寄生性細(xì)菌。蛭弧菌宿主范圍廣泛，不僅能裂解大腸埃希氏菌，沙門(mén)氏菌等常見(jiàn)的細(xì)菌，還能寄生于變形桿菌屬、假單胞菌屬及氣單胞菌屬等一些魚(yú)類病原菌，并且對(duì)病原菌的裂解能力明顯高于其他一些普通細(xì)菌。對(duì)蛭弧菌的研究比較慢，早期的研究主要集中在其生物學(xué)性質(zhì)及生理學(xué)研究，自蛭弧菌(Bdellovibriobacterirvorus HDl00)全基因組的公布，蛭弧菌的研究得到突飛猛進(jìn)的發(fā)展。對(duì)蛭

2、弧菌微生態(tài)學(xué)研究也隨之迅速發(fā)展起來(lái)，而國(guó)內(nèi)主要是進(jìn)行蛭弧菌的水產(chǎn)養(yǎng)殖上的應(yīng)用研究。 本研究從眉山養(yǎng)殖場(chǎng)患病死(或垂死)南方大口鯰中分離到四株魚(yú)類病原菌，分別命名為N1、N2、N3、N4，并利用柯赫原則進(jìn)行人工注射回歸感染試驗(yàn)，證明該四株菌都是病原菌，經(jīng)鑒定N3菌初步鑒定為普通變形桿菌。以普通變形桿菌和嗜水氣單胞菌為宿主菌，從成都通威水產(chǎn)有限公司園內(nèi)魚(yú)塘及其周圍白蓮池村、成都污水處理廠和雅安等地采集的水樣(或土樣)中分離到11株蛭

3、弧菌，并對(duì)其中三株裂解能力比較強(qiáng)的蛭弧菌(Bd-tw1、Bd-tw3、Bd-tw7)進(jìn)行一系列的的生物學(xué)研究。這三株的宿主范圍都比較廣，不僅能裂解變形桿菌、嗜水氣單胞菌和大腸桿菌等革蘭氏陰性菌，還能金黃色葡萄球菌，其中Bd-twl、Bd-tw7甚至能裂解枯草芽胞桿菌。這三株菌具有典型的蛭弧菌特征，個(gè)體較小，在雙層瓊脂平板上出斑時(shí)間較早，并且隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，噬菌斑不斷擴(kuò)大，最后達(dá)到匯合裂解，形成融合菌斑。蛭弧菌Bd-twl適應(yīng)的溫度范

4、圍為4℃-35℃，最適培養(yǎng)溫度為30℃。適應(yīng)pH值為4.0-9.0，最適pH值為7.5。對(duì)溫度較為敏感，在40"C下10miln，蛭弧菌的效價(jià)下降了67％，40℃1h后，蛭弧菌的效價(jià)降至接近零。用得到的蛭弧茵裂解液(10<'8>pfu/ml)進(jìn)行魚(yú)的毒性試驗(yàn)，觀察一周后，試驗(yàn)魚(yú)無(wú)任何不良反應(yīng)，表明蛭弧菌制劑無(wú)毒副作用。 用蛭弧菌制劑潑灑在養(yǎng)殖水體，觀察蛭弧菌對(duì)試驗(yàn)魚(yú)的抗病效果，結(jié)果表明添加蛭弧菌蛭弧菌制劑的試驗(yàn)組中魚(yú)的存活率比對(duì)