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文檔簡介
1、熒光免疫檢測技術在現實生活中應用日益廣泛,遍及環(huán)境污染物監(jiān)測、醫(yī)學檢驗、食品檢驗等諸多領域,發(fā)展迅速。本研究所涉及的生物素-鏈霉親和素系統(BSA)
是具有靈敏度高、特異性強和穩(wěn)定性好的信號多級放大系統;同時藻膽蛋白的光學和物理性質非常符合新一代熒光免疫標記物的要求。
本研究以pUC57-sa 質粒為模板,通過PCR反應擴增出目的基因片段sa,構建表達載體pETDuet-sa。通過大腸桿菌異源表達,成功制備核
2、心鏈霉親和素,對其表達、活性和保存條件等方面進行研究,其分子量為59.2KD,理論活性為16.5u,實測活性16.3u,凍干后可以穩(wěn)定保存。
將SA-CpcB、藻紅膽素合成酶及藻膽蛋白裂合酶進行大腸桿菌體內共表達,得到融合色素蛋白SA-CpcB-PEB。檢測SA-CpcB-PEB的熒光活性,同時將其用于BSA系統中進行熒光免疫檢測,表明SA-CpcB-PEB 同時具有藻膽蛋白的熒光特性和SA與生物素結合的能力。將SA-Cp
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