海螵蛸對胃粘膜損傷保護及其凝血、止血功效研究.pdf

1、海螵蛸，又名烏賊骨，為傳統(tǒng)中藥材，具有抗胃潰瘍、凝血、止血、成骨等生物活性。但是，在烏賊的加工過程中，海螵蛸通常被丟棄，造成資源浪費。如果能根據(jù)海螵蛸自身生物活性開發(fā)成新型藥物或保健食品，不僅能變廢為寶，而且更能產(chǎn)生良好的經(jīng)濟效益。本試驗以海螵蛸為主要原料，采用先進的分析手段對海螵蛸的結(jié)構(gòu)進行檢測，驗證海螵蛸胃粘膜損傷保護作用、凝血、止血活性，并研制出治療胃潰瘍的片劑。主要研究內(nèi)容如下：
　　1、海螵蛸物質(zhì)結(jié)構(gòu)及其主要成分的分析研

2、究。采用環(huán)境掃描電鏡、紅外光譜、X射線衍射、電感耦合等離子體質(zhì)譜4種手段對海螵蛸的結(jié)構(gòu)進行檢測并分析，初步探究其結(jié)構(gòu)與部分生物活性的關系。經(jīng)電鏡掃描發(fā)現(xiàn)，海螵蛸腹面疏松層整體呈房架結(jié)構(gòu)，由疏松多孔的壁龕樣的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)形成。而粉碎后的海螵蛸，其網(wǎng)格結(jié)構(gòu)完全被破壞。但是，經(jīng)動物實驗證實：粉碎后海螵蛸粉末仍具有保護胃粘膜損傷、凝血、止血的活性，這說明此網(wǎng)格結(jié)構(gòu)與其凝血、止血、保護胃粘膜損傷活性關系不大。由紅外掃描和X射線衍射分析可知：海螵蛸含有

3、文石結(jié)構(gòu)的碳酸鈣，完整海螵蛸與其腹層相比化學成分基本相同，但文石含量不同。此外，通過電感耦合等離子體質(zhì)譜檢測，海螵蛸含70種無機元素，其中含大量的Ca，少量的Na、Sr、Fe、P、K、Mg，微量的Si、Zn、Cu、Al、Br、Ba、B、Mn、Ni等。
　　2、海螵蛸對乙醇誘導的急性胃粘膜損傷的保護作用研究。在Wistar大鼠體內(nèi)營造乙醇誘導的急性胃粘膜損傷模型，以不同劑量的海螵蛸對模型Wistar大鼠進行灌胃給藥，測定胃粘膜的損傷

4、面積、損傷指數(shù)、損傷抑制率、胃液體積、酸度、MDA、GSH、T-SOD、PEG2、MPO等指標，比較各組對乙醇誘導的急性胃粘膜損傷的保護效果。結(jié)果顯示：海螵蛸具有保護乙醇誘導的胃粘膜損傷的作用。其作用機制可能是：海螵蛸中的鈣與胃酸產(chǎn)生中和作用，提高胃液pH值，減輕其對胃粘膜侵蝕作用。同時，可調(diào)節(jié)胃粘膜組織中NO含量，加強胃粘膜的屏障功能；促進胃液、胃組織、血清中PGE2的合成，增強黏膜組織的抵抗能力，加速潰瘍的愈合。此外，提高SOD的活

5、力，清除氧自由基和減輕脂質(zhì)過氧化反應，降低胃組織和血清中MDA的含量，減輕對胃粘膜細胞的損傷，不同程度的降低胃組織中MPO的活性，參與調(diào)節(jié)胃粘膜損傷的炎癥反應，可能是其保護胃粘膜的另一機制。
　　3、海螵蛸凝血作用效果研究。通過分析海螵蛸懸浮液對不同實驗組小鼠出血時間和凝血時間的影響，驗證其凝血效果，并對可能的凝血機制進行探討，為新型海螵蛸藥物的開發(fā)提供理論依據(jù)。結(jié)果表明，在250 g/L劑量下，海螵蛸的出血時間和凝血時間分別比生

6、理鹽水對照組縮短11.45 min和1.38 min。海螵蛸各劑量組均能明顯縮短小鼠的出血時間和凝血時間，且不同程度脫鈣后的海螵蛸固形物組的出血時間和凝血時間與生理鹽水對照組相比均差異極顯著。這表明，不論海螵蛸中鈣含量多寡，均具有凝血活性，且未脫鈣海螵蛸的凝血效果最好，對劑量也有一定的依賴性。而單純的碳酸鈣卻不具有凝血活性。海螵蛸能明顯縮短凝血時間，提示海螵蛸凝血活性可能與各種凝血因子的含量及它們的功能有關。海螵蛸能明顯縮短出血時間，這

7、提示海螵蛸可能與血小板數(shù)胃粘膜損傷量、血小板的功能、毛細血管功能、組織因子數(shù)量及組織收縮力等有關。
　　4、海螵蛸體外止血效果研究。通過小鼠試驗，比較海螵蛸與其他常見的止血材料的止血性能。以豚鼠模型，評價海螵蛸粉末對豚鼠背部健康皮膚和破損皮膚產(chǎn)生刺激的反應，探究其致敏性。通過小鼠股動脈橫切面止血試驗，證實了超微粉碎海螵蛸止血時間最短為（1.21±0.11）min，止血速度短于云南白藥和淀粉，止血效果理想。經(jīng)豚鼠背部健康皮膚和破損皮