健胃益氣湯對胃粘膜損傷的保護作用及其機制的實驗研究.pdf

1、胃粘膜損傷是臨床常見病和多發(fā)病，包括胃炎和胃潰瘍等，通常認為主要是胃粘膜的攻擊因子和防御因子失衡所造成的。在藥物治療胃粘膜損傷方面，中藥方劑一直都占有重要地位，自制健胃益氣湯臨床觀察對胃炎和胃潰瘍具有較好療效，但其作用機制尚不十分清楚。 目的建立無水乙醇致大鼠胃粘膜損傷試驗?zāi)Ｐ?，研究預先給予健胃益氣湯對大鼠胃粘膜損傷的保護作用及其對胃粘膜組織細胞凋亡的影響的作用機制，為臨床推廣應(yīng)用該方治療胃粘膜損傷提供科學理論和實驗依據(jù)。

2、 方法1.建立動物模型：本實驗取雄性Wistar大鼠40只，隨機分4組，中藥組、西藥組、試驗對照組、正常對照組。中藥組給予健胃益氣湯(10ml/kg)，西藥組給予麗珠得樂懸浮液(10ml/kg)，兩對照組給予等體積的生理鹽水，分別灌胃，每日一次，連續(xù)四天。取材前禁食24小時，末次給藥后30分鐘，前三組分別無水乙醇灌胃(1mg/只)，1小時后連同正常對照組，輕度乙醚麻醉后一同處死，解剖取胃。2.形態(tài)學觀察：①測量胃粘膜損傷指數(shù)。②取腺胃

3、區(qū)組織制作切片并作H-E及PAS染色，光學顯微鏡觀察胃粘膜組織的病理變化。3.用免疫組織化學ABC法對大鼠胃粘膜組織細胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax等做免疫組織化學研究，檢測并通過圖像分析對以上結(jié)果進行定性、定位、定量分析及統(tǒng)計學處理，研究Bcl-2、Bax的表達與胃粘膜損傷的關(guān)系以及健胃益氣湯對胃粘膜細胞凋亡的影響。 結(jié)果除正常對照組外，無水乙醇使各組大鼠均有糜爛或出血點形成，而中藥(健胃益氣湯)組的糜爛、出血明顯減少，較試

4、驗對照組為輕。中藥組損傷指數(shù)為26.87±6.84，與試驗對照組的98.33±15.36比較有顯著差異(P＜0.01)。鏡檢H-E組織切片顯示，試驗對照組粘膜損傷明顯，并有大量炎癥細胞浸潤。中藥組粘膜損傷較輕，炎癥細胞浸潤少，與試驗對照組比較有顯著差異(P＜0.01)。另外，通過光鏡觀察Alcian-PAS染色切片，中藥組大鼠的粘液PAS陽性面積較多，粘膜PAS反應(yīng)陽性層較厚，與試驗對照組比較，其差異具有顯著性意義(P＜0.01)。經(jīng)免

5、疫組化染色，檢測并用計算機圖像分析系統(tǒng)定量分析，發(fā)現(xiàn)中藥組的Bax蛋白表達降低，Bcl-2蛋白表達增加，與試驗對照組比較，有顯著性差異(P＜O.01)。 結(jié)論1.中藥健胃益氣湯預防用藥能減小胃粘膜損傷指數(shù)，減少炎癥細胞浸潤，增加粘膜粘液含量及厚度，表明了健胃益氣湯良好的抗炎，抗胃粘膜損傷，增強胃粘膜保護和修復的能力。2.給予中藥健胃益氣湯下調(diào)了Bax蛋白表達和上調(diào)了Bcl-2蛋白表達，增高了Bcl-2/Bax，從而抑制了細胞凋亡