β3腎上腺素能受體激動(dòng)劑BRL37344對(duì)前脂肪細(xì)胞分化的影響.pdf

1、目的:觀察β3腎上腺素能受體激動(dòng)劑BRL37344對(duì)前脂肪細(xì)胞分化的影響，并探討其可能的作用機(jī)制。
　　 方法:分別培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細(xì)胞及原代人體前脂肪細(xì)胞。待兩種前脂肪細(xì)胞細(xì)胞貼壁、融合后2天，開(kāi)始誘導(dǎo)分化細(xì)胞，使之進(jìn)入分化階段。在細(xì)胞誘導(dǎo)分化的過(guò)程中，兩種細(xì)胞均分為4個(gè)不同的處理組:空白對(duì)照組，常規(guī)分化組，BRL37344處理組，常規(guī)分化+BRL37344組;使用不同劑量(10-9，10-8，10-7mol/L)的BR

2、L37344作用8天，各組細(xì)胞均進(jìn)行油紅O染色，并提取各組細(xì)胞RNA，應(yīng)用RT-PCR反應(yīng)檢測(cè)各組脂肪細(xì)胞分化過(guò)程的重要調(diào)節(jié)因子過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisomeproliferatorsactivatedreceptor,PPARγ2)，以及它的下游基因同時(shí)也是脂肪細(xì)胞分化標(biāo)志基因的脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(adipocytefattyacidbindingproteins，aP2)、脂蛋白脂肪酶(lipoprotein

3、lipase，LPL)mRNA轉(zhuǎn)錄水平;并使用10-7mol/LBRL37344處理各組細(xì)胞，在選取三個(gè)分化時(shí)間點(diǎn)(0、2、8d)，進(jìn)行油紅O染色，并提取各組細(xì)胞的RNA，分別檢測(cè)在這三天中，各組的細(xì)胞內(nèi)的脂肪細(xì)胞分化相關(guān)基因PPARγ2、aP2、LPLmRNA的轉(zhuǎn)錄水平。
　　 結(jié)果:(1)不同劑量(10-9，10-8，10-7mol/L)的BRL37344作用3T3-L1前脂肪細(xì)胞8天后，呈劑量依賴性的下調(diào)前脂肪細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的

4、PPARγ2、aP2、LPLmRNA的轉(zhuǎn)錄水平，其中10-7mol/L刺激作用最強(qiáng)(P＜0.05);(2)在選取的3個(gè)分化時(shí)間點(diǎn)(0、2、8d)中，各組細(xì)胞PPARγ2、aP2、LPLmRNA水平均呈線性增加;但與空白對(duì)照組相比，BRL37344處理組細(xì)胞內(nèi)PPARγ2、aP2、LPLmRNA水平均降低(P＜0.05);與常規(guī)分化組相比，常規(guī)分化+BRL37344處理組細(xì)胞內(nèi)PPARγ2、aP2、LPLmRNA水平也均降低(P＜0.05