2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、脂肪酶(Lipase,E.C.3.1.1.3),全稱為三?;视王;饷?triacylglyc-erolacylhydrolase),它屬于α/β折疊酶家族,是一種絲氨酸水解酶。脂肪酶的催化遵循絲氨酸水解酶的反應(yīng)機(jī)制,能夠在油水界面上將甘油三酯完全水解成脂肪酸和甘油。因而脂肪酶能夠催化脂水解、脂合成和脂交換等多種反應(yīng),被應(yīng)用于油脂處理、洗滌劑、食品加工、精細(xì)化工、制藥、造紙等多種行業(yè)。脂肪酶在動植物的各種組織及微生物中廣泛存在。

2、r>  稻米脂肪酶存在于稻谷皮層,其酶活性很高,在稻谷脫殼碾米加工過程中,由于碾下的米糠其細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞,脂肪酶和油脂接觸后迅速發(fā)生酯解反應(yīng)極易引起米糠酸敗,因此,長期以來,國內(nèi)外均集中在滅酶鈍化的研究方向上,而極少關(guān)注稻米脂肪酶的開發(fā)利用。
  v本研究選定稻米脂肪酶(Rice Lipase,RL)基因作為研究對象,從基因工程的角度,定向克隆稻米脂肪酶基因轉(zhuǎn)入基因工程菌中進(jìn)行表達(dá),研究RL在大腸桿菌BL21表達(dá)系統(tǒng)及畢赤酵母GS1

3、15表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)情況,對表達(dá)后重組脂肪酶的酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了初步研究,主要包括溫度、pH、表面活性劑、金屬離子、不同鏈長的底物等對脂肪酶活性的影響。
  主要結(jié)論如下:
  (1)酵母表面展示系統(tǒng)是更適合稻米脂肪酶表達(dá)的微生物表達(dá)系統(tǒng)。
  (2)稻米脂肪酶的最適作用溫度為35~45℃,在55℃保溫1h仍能保持97.3%的相對酶活性,在55℃保溫3h后能保持80%以上相對的酶活力;最適pH為8.0,在pH7.0到pH1

4、0.0范圍內(nèi)都能保持80%以上的酶活力,具有較好的熱穩(wěn)定性及pH穩(wěn)定性;
  (3)酵母菌通過高密度發(fā)酵可獲得大量具有RL活性的菌體,不需要特別的分離提純和固定化處理,其重復(fù)使用5次依然可以保持80%以上的活性;
  (4)對中短鏈酯類(C4~C8)表現(xiàn)出更好的水解活性;
  (5)添加金屬離子及表面活性劑也可以提高脂肪酶活性。
  本文對稻米脂肪酶在大腸桿菌及畢赤酵母兩種宿主細(xì)胞中的表達(dá)情況進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究

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