嗜鹽脂肪酶產生菌的篩選、酶學性質及基因組文庫的初步構建.pdf

1、極端環(huán)境微生物以其特殊的生理機能適應了高溫、低溫、高酸堿度、高鹽、高壓等惡劣生存條件，獨特的生存環(huán)境形成了其特有的代謝方式并能夠產生許多具有特殊功能的生物活性物質，如極端酶及抗生素等，它們在醫(yī)藥、食品、農業(yè)、化工、環(huán)保等領域有著重要的應用前景。 從內蒙古錫林浩特地區(qū)鹽湖菌種樣品中篩選到一株嗜鹽脂肪酶高產菌Z4，Z4菌株為革蘭氏陰性桿菌，生長溫度范圍為30～60℃，最適生長溫度為42℃，生長NaCl范圍0.5～5mol/L，最適生

2、長NaCl濃度為3.5mol/L。結合生理生化特征和16SrDNA序列分析結果，將其鑒定命名為HaloterrigenathermotoleransZ4，屬于嗜鹽耐熱古生菌。 Z4菌株的產酶屬于生長耦聯(lián)型，其最適產酶條件為pH8.0、50℃和NaCl3.5mol/L；Z4菌株可以利用多種誘導物產酶，添加1％橄欖油作為誘導物產酶效果最好。 以p-NPB為底物對Z4菌株所產脂肪酶性質進行了研究，結果顯示：金屬離子Ba2+、F

3、e2+和Cu2+對酶具有激活作用，酶活不同程度地提高了20～30％；受PMSF的完全抑制；該酶受到EDTA、SDS和DMSO的抑制，酶活不同程度地下降了20～30％；該酶對NaCl有較高的依賴專一性，在無鹽條件下發(fā)生不可逆變性，至少需要0.5mol/LNaCl維持活性，并且高濃度NaCl對于提高其熱穩(wěn)定性有一定作用。醇類物質對于提高酶的熱穩(wěn)定性有一定作用，丙三醇效果最好。該酶對短鏈底物p-NPB(對硝基苯酚丁酸酯)最適水解條件為：pH8